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夹心-ELISA文献资料
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两种ELISA方法检测日本血吸虫病循环抗原的比较
[目的]比较两种ELISA方法检测血吸虫病患者血清中的循环抗原的效果.[方法]以单克隆抗体为基础的斑点-ELISA和夹心-ELISA.[结果和结论]斑点-ELISA与夹心-ELISA的阳性检出率分别为48.0%～98.8%和12.0%～93.8%.两法的特异性依次为95.4%～100%及90%.
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小鼠脾内免疫法制备重组弓形虫SAG1抗原单克隆抗体
目的 制备小鼠抗重组弓形虫SAG1抗原单克隆抗体,用于早期弓形虫感染的抗原检测.方法 用弓形虫RH株重组抗原SAG1进行常规免疫结合小鼠脾内免疫,杂交瘤技术制备单克隆抗体.ELISA法筛选阳性克隆,经亚克隆建株.诱生腹水法制备抗体,protein-G亲合层析法进行纯化,测定其亚类、效价;Western blot法分析其特异性;夹心-ELISA法检测抗体的敏感性及特异性;检测弓形虫感染小鼠血液循环抗原,同时用PCR法检测弓形虫B1基因并比较结果.结果 获得2株抗重组弓形虫SAG1抗原单克隆抗体3B6、10C4,抗体均为IgG1,轻链均为κ链,Western blot显示2株单抗均能识别弓形虫天然的和重组的SAG1抗原.3B6、10C4敏感度分别为31.3 ng和62.5 ng,与血吸虫病、钩虫病及疟疾患者血清均无交叉反应.弓形虫早期感染检测PCR及ELISA法阳性检出率分别为63.2%、47.4%.结论 成功制备小鼠抗重组弓形虫SAG1抗原单克隆抗体,初步用于早期弓形虫感染诊断.
