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弓形虫GRA4和SAG2基因重组BCG疫苗免疫保护性的比较研究
目的 比较弓形虫致密颗粒蛋白4(GRA4)基因和表面抗原2(SAG2)基因的重组卡介苗(BCG)对小鼠的免疫保护效果.方法 108只SPF级雌性BALB/c小鼠随机分成6组:PBS组、BCG空白菌组、BCG-空白载体组、BCG-SAG2组、BCG-GRA4组和BCG-SAG2+GRA4组,每组18只.每鼠分别注射对应液体/疫苗100μl,共2次,间隔2周.接种前尾静脉采血,接种后4、6、8周每组分别剖杀3只,取脾和眼眶血检测细胞因子、IgG与IgM抗体,T淋巴细胞亚群计数,淋巴细胞转化率等.末次免疫后3周,每组剩余小鼠分别腹腔接种RH株弓形虫速殖子50个进行攻击感染,观察各组小鼠存活时间.结果 弓形虫SAG2和GRA4重组BCG疫苗均能诱导小鼠产生免疫应答.第4周时,BCG-GRA4+SAG2免疫组小鼠的CD3+CD4+/CD3+CD8+的比值高,为14.06%±1.17%.第6周时,BCG-GRA4+SAG2免疫组小鼠的IgG抗体水平高,为0.18±0.02.第8周时,BCG-SAG2免疫组小鼠的IgM抗体水平高,为0.82±0.05;弓形虫速殖子攻击后,BCG-SAG2组平均存活8.61 d,PBS对照组平均存活7.33 d,3个免疫组小鼠比其他3组的平均存活时间长1 d.结论 弓形虫重组BCG疫苗具有一定的免疫保护性.