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栀子、首乌对小鼠卡介苗炎症诱导抑郁模型的抗抑郁作用的实验研究
目的 腹腔注射卡介苗(BCG),建立炎症相关抑郁模型,明确栀子、首乌对炎症诱导抑郁模型的抗抑郁作用和机制.方法 小鼠腹腔注射卡介苗200 mg·kg-1,吗氯贝胺组和栀子首乌组同时分别给予吗氯贝胺75 mg·kg-1和栀子首乌500 mg·kg-1水溶液灌胃,观察药物对动物体重、自主活动和强迫游泳实验中不动时间的影响.同时,使用ELISA法检测脑组织吲哚胺-2,3-过氧化酶(IDO)和N-甲基-D-天冬氨酸受体(NMDAR1)含量.结果 与模型组比较,栀子首乌药不能对抗BCG引起的小鼠体重下降(P＞0.05),对小鼠的自主活动没有明显影响(P＞0.05),但能明显缩短BCG模型小鼠强迫游泳不动时间(P＜0.05),同时降低了脑组织中IDO和NMDAR1含量(P＜0.05或P＜0.01).结论 BCG腹腔注射能引起动物抑郁样行为,栀子、首乌选择性增加小鼠不动时间,显示出一定的抗抑郁作用,其作用机制与抑制IDO活性减少五羟色胺(5-HT)代谢,下调NMDAR1减轻神经元毒性损伤有关.
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牡蛎汤对免疫性肝损伤小鼠血清ALT、AST和肝组织TNF-α的影响
牡蛎汤是通过对我校大量临床研究总结的治疗病毒性肝炎的有效中药方剂.近年来大量研究表明,病毒性肝炎的肝损害与机体对病毒的免疫应答有关.本实验利用卡介苗(BCG)和联合脂多糖LPS诱发小鼠免疫性肝损伤模型,观察牡蛎汤对血清ALT、AST和肝组织TNF-a含量的影响,探讨牡蛎汤肝保护作用的机理.
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佐剂性关节炎大鼠模型的实验研究
目的:改进大鼠佐剂性关节炎(AA)模型制作的实验设计,提高造模成功率.方法:选择影响造模成功率较大的因素,如弗氏完全佐剂(FCA)中的卡介苗(BCG)浓度、FCA注射量、FCA体内注射部位作为研究对象.结果:不同BCG浓度下的高成功率为78.5%;不同注射量高成功率为71.9%;不同注射部位高成功率为70.0%.结论:用含20mg/ml BCG浓度的FCA 0.1ml注射量,后肢足跖皮内注射能明显提高AA大鼠造模的成功率.较以前文献报道的含10mg/ml BCG浓度的FCA 0.05ml注射量,背部多点注射法等有较大的改进.
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黄芪甲苷对免疫性肝损伤大鼠保护作用
目的 探讨黄芪甲苷对卡介苗(BCG)和脂多糖(LPS)诱导肝损伤的保护作用.方法 60只SD大鼠随机分为对照组,模型组(BCG+ LPS),黄芪甲苷(20、40、80 mg/kg)组和联苯双酯(150 mg/kg)组,采用BCG2.5 mg/只静脉注射致敏大鼠,第10 d给予LPS 75 μg/只静脉攻击,复制大鼠免疫性肝损伤模型,黄芪甲苷或联苯双酯组分别同时灌胃给予黄芪甲苷或联苯双酯,连续10 d,分光光度法测定大鼠血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST),超氧化物歧化酶(SOD),丙二醛(MDA)含量;观察肝组织形态学变化;称重法测定肝脏、脾脏指数;酶联免疫吸附法测定血清中TNF-α,IL-6水平.结果 与模型组比较,40、80 mg/kg黄芪甲苷组大鼠血清AST、ALT活性降低、肝脏、脾脏指数降低;与对照组比较,模型组大鼠血清中TNF-α[(60±4.2) pg/mL]、IL-6[(289±12.8)pg/mL]水平、MDA含量[(25.3 ±2.8)nmol/mg prot]升高,SOD活性[(72.2±9.8)U/mg prot]下降;与模型组比较,80 mg/kg黄芪甲苷组大鼠血清中TNF-α[(26±1.5) pg/mL]、IL-6[(139±13.8) pg/mL]水平、MDA含量[(14.2 ±2.9)nmol/mg prot]明显下降,SOD活性[(108.1 ±8.3)U/mg prot]升高.结论 黄芪甲苷对大鼠免疫性肝损伤具有一定保护作用.
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卡介苗对啮齿类脑型疟疾保护作用
目的 探讨卡介苗(BCG)对啮齿类脑型疟疾(CM)的免疫保护效应.方法 以伯氏疟原虫感染C57BL/6小鼠,3d后接种BCG冻干粉(实验组),同时以未接种BCG的感染鼠为对照组,动态观察2组小鼠原虫血症水平和生存率;流式细胞术检测感染后第0、5、8d小鼠脾细胞中CD4+ CD69+T细胞和CD4+ CD25+ Foxp3+Treg的百分率;ELISA方法检测脾细胞培养上清中细胞因子水平.结果 实验组小鼠原虫血症从第9d开始逐渐增高,66.7％的小鼠一直存活到感染后第20 d;而对照组小鼠全部于感染后8～10d死于CM;感染后第5和第8d,实验组活化性T细胞百分数分别为15.45％和11.47％,IFN-Υ水平分别为550.24和407.46 pg/mL,均明显低于对照组的17.74％和15.42％、709.48和600.37 pg/mL(均P＜0.05):而调节性T细胞百分率分别为10.03％和15.18％,IL-10水平分别为930.48和265.87 pg/mL,均明显高于对照组的7.09％和11.77％、603.3和116.27 pg/mL(均P＜0.05).结论 BCG可通过下调炎性反应强度降低CM发生率并延长宿主存活期.
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卡介苗膀胱灌注致尿道狭窄3例
卡介苗(BCG)是膀胱腔内常用的化疗药物,可单纯用于治疗表浅膀胱移行细胞癌,也可用于膀胱癌切除术后治疗.自1998年2月迄今,我们对28例膀胱移行细胞癌术后用BCG行膀胱腔内化疗,在直接经尿道灌药的8例中,3例发生尿道狭窄,现报道如下.
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弓形虫GRA4和SAG2基因重组BCG疫苗免疫保护性的比较研究
目的 比较弓形虫致密颗粒蛋白4(GRA4)基因和表面抗原2(SAG2)基因的重组卡介苗(BCG)对小鼠的免疫保护效果.方法 108只SPF级雌性BALB/c小鼠随机分成6组:PBS组、BCG空白菌组、BCG-空白载体组、BCG-SAG2组、BCG-GRA4组和BCG-SAG2+GRA4组,每组18只.每鼠分别注射对应液体/疫苗100μl,共2次,间隔2周.接种前尾静脉采血,接种后4、6、8周每组分别剖杀3只,取脾和眼眶血检测细胞因子、IgG与IgM抗体,T淋巴细胞亚群计数,淋巴细胞转化率等.末次免疫后3周,每组剩余小鼠分别腹腔接种RH株弓形虫速殖子50个进行攻击感染,观察各组小鼠存活时间.结果 弓形虫SAG2和GRA4重组BCG疫苗均能诱导小鼠产生免疫应答.第4周时,BCG-GRA4+SAG2免疫组小鼠的CD3+CD4+/CD3+CD8+的比值高,为14.06%±1.17%.第6周时,BCG-GRA4+SAG2免疫组小鼠的IgG抗体水平高,为0.18±0.02.第8周时,BCG-SAG2免疫组小鼠的IgM抗体水平高,为0.82±0.05;弓形虫速殖子攻击后,BCG-SAG2组平均存活8.61 d,PBS对照组平均存活7.33 d,3个免疫组小鼠比其他3组的平均存活时间长1 d.结论 弓形虫重组BCG疫苗具有一定的免疫保护性.
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重组日本血吸虫脂肪酸结合蛋白在不同佐剂条件下的免疫效果观察
目的 观察重组日本血吸虫脂肪酸结合蛋白在几种佐剂条件下的免疫预防效果.方法 用E.coli表达日本血吸虫脂肪酸结合蛋白基因,制备日本血吸虫脂肪酸结合蛋白与GST的重组融合蛋白(rSj14/GST),分别以福氏完全佐剂(FCA)/福氏不完全佐剂(FIA)、卡介苗(BCG)和免疫刺激复合物(ISCOM)作为佐剂免疫昆明系小鼠,比较攻击感染后的减虫效果.结果 以BCG为佐剂皮内免疫和以ISCOM为佐剂皮下免疫分别诱导了34.3%和36.0%的减虫率;而以FCA/FIA为佐剂进行免疫,虽然诱导了较高的抗体反应,但几乎没有产生明显的减虫效果(8.5%).结论 BCG和ISCOM均是rSj14/GST的适宜佐剂.
关键词： 日本血吸虫 Sj14 佐剂 卡介苗(BCG) 免疫刺激复合物(ISCOM) -
cAMP在LPS及BCG+LPS诱导的免疫性肝损伤中的作用比较
目的比较LPS、BCG+LPS诱导的免疫性肝损伤模型的特点及肝中cAMP的变化,以建立合适的动物模型,并为药物作用及肝损伤机制探讨提供参考.方法昆明种小鼠,分为5组:①对照组;②BCG组(ip 1 mg*kg-1 BCG,7 d后处理动物);③LPS 0.2 mg;④LPS 0.4 mg组(分别ip 0.2, 0.4 mg*kg-1,6 h后处理动物);⑤BCG+LPS组 (ip 1 mg*kg-1 BCG 7 d后ip 0.2 mg*kg-1 LPS 6 h后处理动物).取血清,测定ALT、GST活性;HE染色,光镜观察组织损伤情况;制备肝匀浆,放射免疫法测定cAMP含量.结果组织学检查表明,给予BCG或LPS均能引起中性粒细胞浸润.单独给予BCG 或0.2 mg*kg-1 LPS未见明显的肝组织损害,但经BCG预处理后,0.2 mg*kg-1 LPS可使血清ALT、GST水平显著增高.单独给予0.4 mg*kg-1 LPS也能引起明显的肝组织损伤.经BCG预处理后的小鼠肝组织内cAMP含量明显下降,而单独LPS刺激,则使肝内cAMP含量呈剂量依赖性增高.结论 LPS、BCG+LPS均能引起典型的免疫性肝损伤,经BCG预处理,能增强内毒素刺激诱导的肝脏毒性.不同的免疫性肝损伤模型所致肝内cAMP含量的变化不同,在进行机制研究及药物药理作用研究时应予以考虑.
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9578例新生儿卡介苗接种后12周阳转率调查
[目的]探讨本市区近5年新生儿卡介苗(BCG)接种工作的质量情况和BCG补种对提高免疫效果的实际价值.[方法]新生儿卡介苗接种后12周,用结核菌素(PPD)皮试,72h后记录皮试反应结果和卡痕大小,阴性者补种BCG.[结果]统计分析9578例,阳性率95.1%,卡痕率98.3%,PPD反应平均直径9.8±3.4 mm,卡痕平均直径4.7±1.3 mm,随着卡痕增大阳转率依序提高.[结论]本市区新生儿BCG接种工作质量已达较高水平.多种监测指标均稳定达标.
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加味茵陈五苓散对免疫性肝损伤保护作用及其机理研究
目的 观察加味茵陈五苓散对免疫性肝损伤的保护作用以阐明其药效和药物作用机理.方法 采用卡介苗(BCG)+脂多糖(LPS)诱导小鼠免疫性肝损伤模型,观察本方对肝损伤小鼠血清谷丙转氨酶(ALT)及谷草转氨酶(AST)活性,脾、肝脏器系数,肝脏病理组织学损伤程度的影响,并检测小鼠肝组织匀浆丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)的含量,血清一氧化氮(NO)含量及肿瘤坏死因子(TNF-α)的含量.结果 加味茵陈五苓散和阳性对照药物五酯片均能显著降低BCG/LPS免疫性肝损伤小鼠血清中升高的ALT、AST水平;且加味茵陈五苓散中剂量降酶作用优于阳性对照组;对肝脾重量的增大有显著的抑制作用;组织病理检查结果显示本品中、高剂量可减轻肝组织坏死范围及程度,减少炎细胞浸润,有明显的保肝作用.同时发现中剂量药物可显著降低肝匀浆中升高的MDA水平,提高肝匀浆 SOD水平,显著降低血清中升高的NO含量和TNF-α含量.结论 加味茵陈五苓散对免疫性肝损伤具有保护作用,其机制可能与其直接清除自由基、降低脂质过氧化物水平、提高SOD活性、减少炎性细胞因子的产生和调节机体免疫功能等有关.
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不同剂量卡介苗膀胱灌注联合中药治疗浅表性膀胱肿瘤术后临床观察
目的:观察不同剂量卡介苗膀胱灌注联合中药治疗浅表性膀胱肿瘤术后患者的复发与不良反应情况.方法:将198例浅表性膀胱肿瘤术后患者按卡介苗灌注剂量分为3组,分别接受120 mg、60 mg和30 mg 3种不同剂量的卡介苗膀胱灌注,随访6～24月,选取临床和随访资料完整的病例,观察肿瘤复发和不良反应发生情况.结果:60 mg组患者的膀胱灌注不良反应较120mg组轻(P＜0.05),肿瘤复发率低于30 mg组(P＜0.05).结论:卡介苗灌注剂量为60 mg时不良反应更轻,肿瘤复发率更低.
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6kD早期分泌型抗原靶点(ESAT6)抑制巨噬细胞的自噬并促进BCG的增殖
目的 6 kD早期分泌型抗原靶点(ESAT6)能够促进卡介苗(BCG)的增殖,巨噬细胞的自噬功能能有效杀伤BCG,研究ESAT6与自噬的相互作用,为揭示ESAT6介导的免疫逃逸提供实验依据.方法 分别观察对照质粒pCMV-HA和重组质粒pCMV-HA-ESAT6转染以及Earle平衡盐溶液(EBSS)处理的小鼠RAW264.7巨噬细胞中BCG的生长情况,Western blot法检测转染pCMV-HA-ESAT6的RAW264.7细胞0、8、12、24、32 h后,微管相关蛋白1轻链3(LC3)蛋白水平.转染pCMV-HA、pCMV-HA-ESAT6、氯喹(CQ)单独处理和CQ与pCMV-HA-ESAT6转染联合处理条件下,Western blot法检测LC3的水平,LysoTracker Red染料法计数溶酶体数量,观察罗琴培养基上BCG的情况.结果 pCMV-HA-ESAT6转染的RAW264.7细胞中BCG的生长旺盛,而EBSS处理组生长受抑制;在0、8、12、24、32 h,pCMV-HA-ESAT6转染的RAW264.7细胞中LC3 Ⅰ向LC3Ⅱ转换逐渐增强;与对照组相比,溶酶体荧光探针LysoTrackerRed染色法显示pCMV-HA-ESAT6、CQ以及CQ与pCMV-HA-ESAT6转染处理组的溶酶体较多且体积大,但后三组间均无显著性差异;pCMV-HA-ESAT6、CQ以及CQ与pCMV-HA-ESAT6转染处理组的BCG生长旺盛.结论 ESAT6抑制RAW264.7细胞内的自噬水平,并且能够促进RAW264.7细胞中感染BCG的生长.
关键词： 早期分泌型抗原靶点6(ESAT6) 巨噬细胞 自噬 卡介苗(BCG) -
卡介苗诱导的固有免疫记忆
固有免疫记忆是机体初次感染后对相同或不同病原体再次感染的高反应性,是一种不依赖T、B细胞适应性免疫的、记忆性的固有免疫应答,又称为训练免疫.训练免疫机制涉及免疫、代谢组及表观遗传之间复杂的相互作用.卡介苗(BCG)接种后诱导的固有免疫在结核分枝杆菌感染免疫中具有重要作用,而且对非分枝杆菌再感染及肿瘤亦具有交叉免疫作用,其机制为BCG诱导的训练免疫.我们总结了训练免疫的概念及机制、BCG诱导的训练免疫及作用机制.
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岳阳市楼区新生儿卡介苗接种质量分析
目的 了解岳阳市楼区新生儿卡介苗接种后阳转率,卡痕大小及两者的关系.方法 对2006年6月～2007年6月751例新生儿卡介苗接种后12周PPD试验结果进行分析.结果 卡痕率93.2%,阳性率89.5%,随着卡痕增大PPD阳转率依序提高.结论 岳阳市楼区新生儿BcG接种质量已达较高水平.要提高卡介苗的阳转率,必须保证卡介苗的质量和接种技术.
