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E型沙眼衣原体主要外膜蛋白多克隆抗体的制备、鉴定和初步应用
目的 表达E型沙眼衣原体主要外膜蛋白(MOMP)并制备其兔源多克隆抗体.方法 诱导表达实验室构建的MOMP/pGEX6p-1重组质粒,通过胶回收进行目的蛋白的纯化.MOMP免疫新西兰家兔制备多克隆抗体,ELISA法测定抗体效价,Western印迹、细胞免疫荧光方法鉴定抗体的特异性.结果 在大肠埃希菌中成功表达融合蛋白谷胱甘肽巯基转移酶(GST)-MOMP.ELISA法检测抗体的效价达到1∶12 800,Western印迹结果显示抗体可与原核表达的MOMP特异性结合,细胞免疫荧光检测结果显示抗体可与体外培养的沙眼衣原体特异性结合.结论 成功表达了E型沙眼衣原体的MOMP,并制备了高效价、高特异性的抗MOMP抗体,为沙眼衣原体的检测和临床研究提供依据.
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食管癌端粒酶活性检测的意义
目的 探讨食管癌组织中端粒酶活性检测的临床意义.方法 采用聚合酶链反应-酶联免疫吸附法(PCR-ELISA)检测了43例食管癌组织及相应癌旁组织、8例食管良性疾病组织端粒酶活性表达.结果 43例食管癌组织中36例端粒酶活性阳性表达,阳性率为83.7%,而癌旁组织4例阳性,阳性率为9.3%,8例良性疾病食管组织端粒酶表达均为阴性.食管癌端粒酶检测阳性率明显高于癌旁组织及良性疾病食管组织.食管癌组织端粒酶活性表达与癌细胞分化程度及淋巴结转移情况有密切关系.结论 测定食管癌组织中端粒酶活性对食管癌诊断及预后判断具有重要价值.
关键词: 食管肿瘤/酶学 端粒末端转移酶/代谢 聚合酶链反应 酶链免疫吸附测定