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聚合酶链反应检测隐孢子虫
微小隐孢子虫(Cryptosporidium parvum,Cp)是引起人类腹泻的重要原因之一[1-3 ],获得性免疫缺陷综合征(AIDS)患者也常易感染.现有微小隐孢子虫病的诊断方法中,粪便涂片染色查找卵囊可因粪中卵囊太少、染色剂放置过久、操作方法不熟练或因非特异性嗜酸性颗粒出现而漏诊、误诊.免疫学试验欠敏感,体外培养周期太长,且难以控制.应用核酸杂交技术检测微小隐孢子虫灵敏、特异,但耗时、烦琐、技术要求高和价格昂贵,不适宜于临床应用.近年报道聚合酶链反应(PCR)对检测微小隐孢子虫具有高度特异性和灵敏性,对少至每ml含500个卵囊或只含2pgDNA的微小隐孢子虫模板也能检出[4-6 ].但上述报道中有关微小隐孢子虫的模板制备仍较复杂,均需经过酚-氯仿抽提,且多次转换离心管亦易造成交叉污染.我们的实验目的旨在对微小隐孢子虫模板制备方法[5]加以改进,探索一种更为简便的微小隐孢子虫模板制备方法,以便使微小隐孢子虫的PCR技术真正能推广到临床应用.