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cAMP应答元件结合蛋白H文献资料
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活化的CREBH蛋白对脂肪酸诱导的脂肪变性肝细胞中C反应蛋白表达的调控研究
目的 建立脂肪酸诱导的脂肪变肝细胞模型,探讨活化的cAMP应答元件结合蛋白H(CREBH)蛋白对该模型中C反应蛋白表达的影响.方法 给予L02细胞不同比例和浓度的油酸软脂酸混合液(2∶1、1∶2和0∶3),分别干预12和24 h.CCK-8法测定细胞活力.流式测定细胞内脂肪含量.实时PCR方法检测细胞内C反应蛋白、CREBH、C/EBP同源蛋白C/EBP(CHOP)和免疫球蛋白结合蛋白(BIP) mRNA表达水平变化.Western印迹法检测细胞核内活化的CREBH蛋白含量.RNA干扰靶向沉默CREBH蛋白后再分别采用混合脂肪酸干预24h.实时PCR方法检测细胞内C反应蛋白、CREBH、CHOP和BIP mRNA表达水平变化.结果 (1)混合脂肪酸诱导肝细胞脂肪变.随着软脂酸比例的升高,细胞内C反应蛋白表达水平升高,并且具有时间依赖性.(2)混合脂肪酸可以诱导CREBH表达升高(P＜0.05),可增加核内CREBH蛋白水平.(3)混合脂肪酸中软脂酸比例越高,内质网应激标志增加越显著.(4)CREBHsiRNA可有效抑制CREBH表达.敲除CREBH基因后,C反应蛋白表达显著下降(P＜0.05).结论 软脂酸可上调肝细胞C反应蛋白表达水平,但是油酸无此作用.活化的CREBH可调节软脂酸诱导的C反应蛋白表达.
关键词： 脂肪变性肝细胞 cAMP应答元件结合蛋白H C反应蛋白 内质网应激 饱和脂肪酸
