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软骨潜能文献资料
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CD204阴性人脂肪来源细胞体外成软骨潜能的初步研究
目的 比较CD204+和CD204-两种人脂肪来源细胞的干细胞特性和体外诱导成软骨的能力.方法 分离培养人脂肪来源细胞并进行流式细胞分选,分别获得CD204+和CD204-两种细胞.将这两种细胞培养扩增至第2代,观察其形态学特点；成脂、成骨定向诱导分化,油红O染色、茜素红染色定性；同时将两种细胞进行pellet成软骨诱导分化,比较体外诱导成软骨的能力,并以HE、Safranin O和Ⅱ型胶原免疫组化染色等进行鉴定.结果 经流式细胞分选,脂肪来源细胞中CD204表达阳性率约为10％.分选后的CD204+和CD204-细胞均呈成纤维细胞样贴壁生长,但CD204-细胞具有更强的增殖能力.成脂诱导10d后,两组细胞油红O染色均可见胞浆内有大量红染脂滴,但 CD204+细胞具有更强的成脂潜能.成骨诱导2周后,两组细胞茜素红染色均可见钙结节红染,而CD204-细胞具有更强的成骨潜能.同时,细胞pellet成软骨诱导4周后,大体观可见CD204-细胞组pellet形成白色透明样软骨成分,而CD204+细胞组pellet外观微黄.HE和Ⅱ型胶原免疫组化染色均显示CD204-组pellet可见成熟软骨陷窝形成,SafraninO染色显示CD204-组软骨特异性细胞外基质沉积；而CD204+细胞组pellet则呈纤维化改变.结论 脂肪组织来源的CD204-细胞具有干细胞的生物学特点,且有良好的成软骨潜能,可以成为软骨组织工程良好的种子细胞来源.
