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不同转移潜能骨肉瘤细胞差异表达基因的筛查
目的:研究不同转移潜能骨肉瘤细胞差异表达的基因,筛选骨肉瘤转移相关的基因.方法: 分别提取低转移骨肉瘤细胞株M6和高转移骨肉瘤细胞株M8细胞总RNA,采用cDNA基因芯片筛查M6和M8细胞差异表达的基因,杂交信号用Generation Ⅲ array扫描,结果用Imagequant 5.0软件分析.选择基因芯片筛选到的典型差异表达基因用实时定量PCR进行验证.结果: M6和M8骨肉瘤细胞株差异表达的基因共有330个,其中与低转移组(M6)相比,在高转移组(M8)中显著性上调表达的基因有178个,下调表达的基因有152个.其中发生非常显著性上调表达的基因43个,发生非常显著性下调表达的基因49个.差异基因主要包括与细胞增殖相关的基因,提示与M8细胞增殖受抑相关;其次是与基因表达调控及信号转导相关的基因,提示这些基因和肿瘤转移有关联性.结论: 基因芯片方法对于筛选骨肉瘤转移相关基因有独特的优势,MG63细胞M8亚株中筛查到显著性上调的基因43个,显著性下调的基因49个,与骨肉瘤的转移有关.
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骨肉瘤转移的相关分子及临床应用研究进展
为了提高骨肉瘤患者的生存间期及生活质量,需要终解决以下几个问题:为什么骨肉瘤会发生转移,尤其是转移到肺上?重要的是为什么肺转移的骨肉瘤患者对化学治疗不敏感?研究发现,发生肺转移的骨肉瘤细胞表现出了和原发性肿瘤细胞完全不同的生物学特性[1～3].研究发现,发生转移后的肿瘤细胞群在细胞倍增速度、酶表达谱、染色体组型和化疗药物的敏感性方面都不同于其原发的肿瘤细胞群[4].这就解释清楚了对原发肿瘤有效的化疗方案,为什么却对转移性肿瘤丝毫不起作用.
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p53凋亡刺激蛋白2通过稳定β-catenin-E-cadherin复合体抑制骨肉细胞转移
目的 探讨p53凋亡刺激蛋白2(ASPP2)对骨肉瘤细胞转移的影响及其机制.方法 Q-PCR检测骨肉瘤组织和细胞中ASPP2 mRNA的表达;western blot检测骨肉瘤细胞中ASPP2蛋白表达;transwell检测细胞转移能力;co-IP实验检测β-catenin和E-cadherin相互作用水平;免疫荧光检测β-catenin在细胞核中表达水平.结果8例手术标本Q-PCR检测发现,骨肉瘤组织中ASPP2 mRNA的表达较癌旁组织明显降低;4株骨肉瘤细胞系中(OS187、SAOS2、HOS和MG63)ASPP2 mRNA和蛋白的表达较正常成骨细胞明显减少.过表达ASPP2蛋白的SAOS2其转移能力明显减弱,同时β-catenin和E-cadherin相互作用水平增加,而β-catenin核转位减少.结论ASPP2可以减少骨肉瘤细胞SAOS2的转移,其机制可能的通过稳定β-catenin-E-cadherin复合体,抑制β3-catenin核转位.
