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Cathepsin B反义RNA抑制乳腺癌细胞的侵袭和迁移
目的:探讨人cathepsin B(CatB)反义RNA在乳腺癌细胞侵袭与迁移中的作用.方法: 构建携CatB反义RNA的重组质粒pBudCE4.1-antiCatB,采用脂质体法将重组质粒瞬时转染人乳腺癌细胞MDA-MB-231.Western blotting法检测MDA-MB-231细胞中CatB蛋白的表达, MTT法检测MDA-MB-231细胞的增殖,细胞-基质黏附实验检测反义CatB对MDA-MB-231细胞黏附能力的影响,体外侵袭、迁移实验分析反义CatB表达对MDA-MB-231细胞体外侵袭和迁移能力的影响.结果:成功构建pBudCE4.1-antiCatB表达载体.转染MDA-MB-231细胞后,与未转染组细胞和转染空载体组细胞相比,转染组MDA-MB-231细胞的CatB蛋白表达水平明显降低[(0.96±0.02) vs(1.98±0.23),(1.84±0.08),P<0.05];转染组细胞的增殖受到明显抑制[(0.255±0.017) vs(0.458±0.033),(0.421±0.022),P<0.01];转染组细胞的黏附(基质胶或纤维黏连蛋白)能力明显下降[(0.054±0.017) vs(0.111±0.018),(0.107±0.017), P<0.01;或(0.052±0.008) vs(0.120±0.014),(0.113±0.009), P<0.01];转染组细胞的侵袭和迁移能力也明显降低[(52.80±7.76) vs(124.00±44.54),(116.80±32.87), P<0.01;(60.25±8.73) vs(132.50±12.15),(119.20±25.13), P<0.01].结论:CatB反义RNA可抑制乳腺癌细胞体外生长、黏附、迁移和侵袭能力.
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Cathepsin K在肉芽肿诊断和鉴别诊断中的应用
目的 观察Cathepsin K在克罗恩病、结核、结节病、异物肉芽肿等肉芽肿性病变中的表达,探讨其在诊断肉芽肿病变中的临床价值.方法 采用免疫组化EnVision两步法检测Cathepsin K、CD68在10例克罗恩病、5例结核、4例结节病和5例异物肉芽肿中的表达,并结合阳性细胞数量及其位置进行分析.结果 Cathepsin K在克罗恩病、结核、结节病和异物肉芽肿中活化的类上皮细胞中呈强阳性表达,在成纤维母细胞中呈弱阳性表达,在背景中的巨噬细胞中不表达;而CD68表达于所有类型的巨噬细胞.与CD68相比,Cathepsin K的表达更具特异性.结论 Cathepsin K广泛表达于机体各类肉芽肿中,包括克罗恩病、结核、结节病和异物肉芽肿,其可作为诊断肉芽肿的一种有效标记物.
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cathepsin L及其抑制剂cystatin C在急性脱髓鞘动物模型中的表达及意义
在饲料中掺入cuprizone饲育小鼠6周,制备急性脱髓鞘动物模型.进而利用髓鞘荧光染色和原位杂交方法,检测动物胼胝体内髓鞘的脱失以及cathepsin L及其抑制剂cystatin C的表达情况.结果发现,与正常动物比较,cuprizone饲育6周后小鼠胼胝体内髓鞘脱失严重,胼胝体内cathepsin L和cystatin C的表达均显著上调.结果提示,髓鞘损伤后cathepsin L高表达可能有助于髓鞘残骸的清理,其抑制剂cystatin C的表达增强可将蛋白水解程度控制在一定范围内,这对髓鞘再生具有积极的意义.
