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人类造血干细胞文献资料
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胎肝AFT024细胞对脐血CD34+细胞体外扩增及多药耐药基因转染的影响
目的:探讨胎肝AFT024细胞对人类脐血造血干细胞体外扩增的作用及对多药耐药基因(MDR1)转染效率的影响.方法: 应用AFT024细胞支持下体外长期培养的方法将人类MDR1基因转入脐血CD34+ 细胞,观察细胞扩增倍数来检测AFT024细胞对造血干/祖细胞的扩增能力,采用RT-PCR、流式细胞术及耐药集落检测的方法测定基因转染效率、P-糖蛋白(P-gp)的表达及其功能活性.结果: (1)培养21 d后AFT024细胞对有核细胞总数(TNC)的扩增没有明显作用,但CD34+ 细胞和集落形成细胞(CFC)的扩增倍数[(37.9±13.9)倍和(27.1±13.3)倍]均明显高于对照组[(9.1±2.3)倍和(7.7±3.6)倍],差异均有统计学意义(P＜0.01).(2)RT-PCR法可在AFT024组的转染细胞中检测到较高的MDR1 mRNA水平,AFT024组基因转染效率(46.0%)明显高于对照组(15.2%);两组P-gp的表达分别为(31.7±10.2)% 和(12.6±3.9)%;Rhodamine-123排出试验显示,具有P-gp功能活性的细胞分别为(35.5±11.4)%和(16.6±3.2)%,组间比较差异均有统计学意义(P＜0.01).结论: AFT024细胞具有较强的扩增造血干/祖细胞的能力,并能明显提高MDR1基因在脐血CD34+ 细胞中的转染效率.
