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MiR-219-5p对人脑成胶质细胞瘤恶性表型的影响
目的:探讨miR-219-5p对人脑成胶质细胞瘤(glioblastoma,GBM)的恶性表型——增殖、凋亡和侵袭的影响,初步寻找与miR-219-5p发挥抑癌作用有关的靶点基因.方法:在60例GBM组织中分析miR-219-5p表达水平及mRNA表达谱,筛选与miR-219-5p表达量呈负相关的mRNA;选取前50个相关性大的mRNA,用基因功能分析软件DAVID从中筛选出与GBM恶性进展相关的2组mRNA;后用4个在线靶点预测网站从这2组中预测miR-219-5p的潜在靶点.采用MTT法、流式细胞术和Transwell实验初步验证miR-219-5p对GBM细胞增殖、凋亡和侵袭的影响.结果:60例GBM组织中筛出14个与增殖和凋亡相关的基因和5个与侵袭相关的基因(P＜0.001)；在这19个候选基因中预测到4个基因(TWIST1、MYO1B、WEE1和SPRED2)是miR-219-5p的潜在靶点.实验初步证明,miR-219-5p能够抑制GBM细胞的增殖和侵袭以及促进细胞凋亡(P＜0.05).结论:MiR-219-5p可能通过作用于多个靶点对GBM的恶性表型起到抑制作用.
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miR-219-5p对非小细胞肺癌细胞增殖、凋亡与侵袭的影响及其机制
目的:探索miR-219-5p对非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)细胞增殖、凋亡及侵袭的影响,并探讨其机制.方法:采用RT-PCR检测miR-219-5p在NSCLC细胞系H1299,A549,H1975及正常肺上皮细胞系BEAS-2B中的表达.将NSCLC细胞系H1299分成对照组和miR-219-5p组,用Lipofectamine 2000分别转染miR-219-5p scramble和miR-219-5p mimics,采用MTT法、流式细胞术及Transwell实验分别检测比较两组细胞增殖、凋亡及侵袭能力,Western印迹测定表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)及裂解型多聚腺苷二磷酸核糖聚合酶(poly ADP ribose polymerase,PARP)在两组细胞中的表达.结果:miR-219-5p在H1299,A549和H1975细胞系中的表达量均低于BEAS-2B,差异有统计学意义(P<0.05);MTT实验显示在48,72,96及120 h,miR-219-5p组OD490 nm值显著低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);miR-219-5p组细胞凋亡率显著高于对照组(13.33%±1.20%vs 3.43%±0.12%),差异有统计学意义(P<0.01);miR-219-5p组侵袭细胞数显著少于对照组(67.5±9.9 vs 189.5±16.7),差异有统计学意义(P<0.05);miR-219-5p组EGFR蛋白相对表达量为0.35±0.07,miR-219-5p组EGFR蛋白相对表达量显著低于对照组(1.0),差异有统计学意义(P<0.01);miR-219-5p组裂解型PARP蛋白相对表达量显著高于对照组(2.74±0.17 vs 1.0),差异有统计学意义(P<0.01).结论:miR-219-5p可抑制NSCLC的细胞增殖和侵袭并促进其凋亡,其机制可能与下调EGFR及上调PARP的表达有关.
关键词： miR-219-5p 非小细胞肺癌 增殖 侵袭 凋亡
