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脑源性神经营养因子及其受体原肌球蛋白相关激酶B在肝癌组织中的表达以及对肝癌细胞97-H凋亡和侵袭作用的影响
目的:研究脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)及其受体原肌球蛋白相关激酶B (Tropomyosin-related kinase B,TrkB)在人肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)中的表达情况,并探讨2者在HCC发生、发展中的作用.方法:采用蛋白质印迹法检测BDNF和TrkB蛋白在30例HCC和癌旁组织中的表达情况.采用ELISA法检测BDNF在人HCC细胞系97-H培养液上清中的浓度；FCM和Transwell 小室法分别检测抗BDNF抗体或TrkB激酶活性抑制剂K252a对细胞凋亡和侵袭的影响.结果:30例配对组织标本中,BDNF和TrkB在HCC组织中的表达水平高于癌旁组织(P均＜0.05).BDNF在97-H细胞培养液上清中的表达量为( 119.08±6.21) pg/mL.抗BDNF抗体或K252a都能有效诱导97-H细胞的凋亡,并抑制细胞的侵袭能力.结论:BDNF/TrkB可能对HCC细胞的存活和侵袭具有重要的支持作用,并促进HCC的发生及发展.
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脑源性神经营养因子在ATP活化BV2小胶质细胞中的作用
目的：探讨脑源性神经营养因子（BDNF）在腺苷三磷酸（ATP）激活BV2小胶质细胞过程中的作用。方法以不同浓度ATP孵育BV2小胶质细胞后，采用Western blot法定量检测细胞中CD11b、BDNF表达水平，ELISA测定上清液中肿瘤坏死因子α（TNF‐α）的分泌水平。再将BV2细胞用不同浓度BDNF清除剂原肌球蛋白相关激酶B（TrkB）／Fc预处理后给予ATP孵育，检测细胞中CD11b、BDNF表达水平的变化及上清液中 TNF‐α的分泌水平。后加入外源性重组BDNF ，检测细胞内CD11b表达和上清液中TNF‐α的水平变化。结果 ATP孵育BV2细胞后，细胞内 CD11b、BDNF及上清液中 TNF‐α水平在一定范围内呈剂量时间依赖性增加。加入TrkB／Fc后，BV2细胞中 CD11b、BDNF及上清液中TNF‐α表达水平在一定范围内呈剂量和时间依赖性降低。加入外源性BDNF后，细胞内CD11b及上清液中TNF‐α水平又出现增加。结论 BV2小胶质细胞活化后细胞内BDNF增多，外源性补充BDNF可激活小胶质细胞，BDNF在小胶质细胞的活化过程中可能发挥了重要作用。
