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新疆哈萨克族食管癌组织中HPV16 E6、E7基因的检测与p53的关系
目的探讨人乳头状瘤病毒(HPV)16型感染在新疆哈萨克族(哈族)食管癌发病中的作用,并分析HPV16感染与p53过表达之间的关系.方法采用聚合酶链(PCR)技术,检测41例食管鳞状细胞癌组织中HPV16 E6与E7基因表达差异;用LSAB免疫组织化学方法分析p53蛋白的表达.结果癌组织中HPV16 E6与E7基因阳性检出率分别为34.15%(14/41)和63.41%(26/41);用免疫组化检出p53蛋白阳性率分别在HPV16 E6阳性组(57.1%)与HPV16 E6阴性组(14.8%)间、HPV16 E7阳性组(42.3%)与HPV16 E7阴性组(6.7%)间均存在显著性差异(P＜0.05);用PCR检出HPV16 E6、E7基因在食管癌的高分化组、中低分化组中的检出率分别为7.69%(1/13)、46.43%(13/28)和38.46%(5/13)、75.00%(21/28),差别均有统计学意义(P＜0.05).结论提示p53基因突变与HPV16感染在哈族食管癌的发病过程中存在相互促进作用;另外,HPV16 E6与E7基因和哈萨克族食管癌病理组织学分级的生物学行为密切相关.
关键词： 食管肿瘤 癌 鳞状细胞 哈萨克族 P53蛋白 人乳头状瘤病毒16E6 人乳头状瘤病毒16E7 -
HPV16 E7 siRNA 表达载体对宫颈癌CaSki细胞增殖及成瘤性的影响
目的:通过载体介导的RNA干扰技术干扰E7癌基因的表达,探讨HPV16 E7 小干扰RNA(siRNA)表达载体对宫颈癌CaSki细胞增殖及成瘤性的影响,以及成为宫颈癌基因治疗新策略的可行性.方法:利用脂质体将HPV16 E7特异性siRNA表达载体、空载体转染CaSki细胞,分别命名为CaSki-S、CaSki-P.通过荧光定量RT-PCR及流式细胞仪检测CaSki、CaSki-S、CaSki-P 3种细胞E7 mRNA和蛋白的变化,通过流式细胞仪及MTT法检测3种细胞的细胞周期及生长曲线变化,并检测3种细胞在裸鼠体内成瘤性及生长活性的差异. 结果:荧光定量RT-PCR及流式细胞仪检测显示,CaSki-S细胞E7基因mRNA和蛋白的表达明显低于CaSki细胞,抑制率分别为92.86%、84.21%.MTT法检测显示,CaSki-S细胞生长明显慢于CaSki细胞.流式细胞仪检测细胞周期显示,CaSki-S细胞与未转染组CaSki细胞比较,G1期细胞比例明显增加,S期细胞比例则明显减少.裸鼠体内成瘤性及生长活性显示CaSki-S细胞显著低于CaSki细胞.而CaSki-P细胞无论是在E7 mRNA和蛋白的表达,还是在肿瘤细胞生长、细胞周期的改变及成瘤性方面都与CaSki细胞无明显差异.结论:HPV16 E7 siRNA表达载体能有效地抑制宫颈癌CaSki细胞E7基因的表达,部分逆转其恶性表型.因此它有望成为宫颈癌基因治疗的新策略之一.
关键词： 人乳头状瘤病毒16E7 siRNA表达载体 宫颈肿瘤 基因疗法
