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过氧化物酶体增殖激活性受体γ(PPARγ)在肝癌组织中的差异性表达
目的检测过氧化物酶体增殖激活性受体γ(PPARγ)在肝癌组织中有无差异性表达且有无突变.方法用半定量RT-PCR,Western blot,FISH,PCR-SSCP等方法进行鉴定.结果用半定量RT-PCR检测,有8/14为癌中高表达;Western blot方法检测,9/15为癌中高表达.免疫组化显示PPARγ在所有的癌旁组织中定位于细胞浆中;而在5个癌组织中定位于细胞核中;突变热点PPARγ外显子3和5在34对肝癌标本中没有突变.结论过氧化物酶体增殖激活性受体γ在肝癌组织中有差异性表达并且在肝癌标本中没有突变.提示PPARγ可能与肝癌的发展有一定的相关性.
关键词: 肝肿瘤 过氧化物酶体增殖激活性受体γ 基因表达 突变 -
ATRA对人骨髓间充质干细胞成脂肪细胞分化及瘦素生成的影响
目的 探讨全反式维甲酸(ATRA)对人骨髓间充质干细胞(BMSC)成脂肪细胞分化及瘦素(Lp)生成的影响.方法 体外分离、培养和鉴定BMSC.在诱导培养液中加入不同浓度的ATRA进行成脂肪分化诱导,光学显微镜下油红O染色观察BMSC分化情况;RT-PCR和Western blotting测定细胞过氧化物酶体增殖激活性受体γ(PPARγ)和脂肪酸结合蛋白4(FABP4)基因及相应蛋白表达;RT-PCR和ELISA法检测分化过程中细胞Lp基因表达及蛋白分泌水平的变化.结果 ATRA(0.1~1.0μmol/L)作用后,BMSC向脂肪细胞分化呈现浓度依赖性抑制,PPARγ、FABP4 mRNA和蛋白表达均呈现一致性下降;诱导后细胞Lp mRNA表达和蛋白分泌显著减少.结论 0.1~1.0μmol/L ATRA可抑制BMSC向脂肪细胞分化及其Lp生成,其机制可能与下调PPARγ和FABP4表达有关.