首页 > 文献资料
-
鲫鱼视网膜ON型双极细胞的轴突末梢中不存在ryanodine受体门控的钙库
以前结果表明,ryanodine受体(ryanodine receptors,RyRs)门控的咖啡因敏感的钙库和钙引钙释放(Ca2+-induced Ca2+release,CICR)机制存在于鲫鱼视网膜ON型双极细胞的胞体中[1].采用RyRs的免疫细胞化学方法和细胞内钙测量技术,我们进一步研究了RyRs门控的钙库是否存在于这些细胞的轴突末梢中.视网膜纵切和分离细胞的免疫细胞化学研究显示,RyRs主要位于ON型双极细胞的胞体中.咖啡因浓度升至40 mmol/L在轴突末梢不能诱导钙信号.在细胞外K+浓度升至10 mmol/L引起静息[Ca2+]i轻微升高后,咖啡因在轴突末梢也不能诱导钙信号.在forskolin或多巴胺引起细胞内cAMP浓度升高,进而cAMP依赖的磷酸化增强后,咖啡因在轴突末梢仍不能诱导钙信号.此外,50 μmol/L ryanodine对65 mmol/L K+作用1 min或2 min诱导的轴突末梢的钙信号没有产生任何效应.这些结果表明,在鲫鱼视网膜ON型双极细胞的轴突末梢中不存在RyRs门控的咖啡因敏感的钙库和CICR机制.
关键词： 双极细胞 咖啡因 高钾 Ryanodine受体 轴突末梢 -
内嗅皮层-海马投射末梢基于光纤技术的钙活动记录
目的 运用光纤探测系统建立轴突末梢Ca2活动的光学记录方法,并初步探究麻醉和自由活动状态下小鼠皮层-海马通路的活动规律.方法 向8 ～ 10周龄雄性C57BL/6小鼠内侧内嗅皮层(medial entorhinal cortex,MEC)浅层(Ⅱ层)注射神经元特异并携带Ca2+荧光指示蛋白基因的腺相关病毒(AAV-Syn-GCaMP5 G),继续饲养1个月后将光纤植入到海马齿状回(dentate gyms,DG)分子层上沿,记录麻醉和自由活动状态下轴突末梢的Ca2+活动;相同方法记录AAV-Syn-增强绿色荧光蛋白(eGFP)小鼠作为对照.向MEC浅层注射河豚毒素(tetrodotoxin,TTZ),同步记录轴突末梢Ca2活动,注射人工脑脊液(artificial cerebrospinal fluid,ACSF)作为对照.结果 内嗅皮层Ⅱ层神经元投射至海马DG的轴突纤维密集表达GCaMP5G.在麻醉和自由活动的小鼠中均能稳定记录到轴突末梢Ca2+信号,eGFP对照小鼠未记录到类似Ca2+信号.MEC浅层注射TTX后,轴突末梢Ca2信号100 s内高幅度降至注射前的12.6％.与ACSF比较,TTX对轴突末梢Ca2+活动有明显阻断作用(P＜0.01).内嗅皮层投射至DG的轴突末梢处Ca2+活动在麻醉状态下以一定节律同步发放,自由活动状态下则表现为无节律非同步发放,且Ca2+信号幅度有所增强.结论 通过GCaMP5G特异标记了内侧内嗅皮层Ⅱ层投射至DG的轴突纤维,并运用光纤探测系统建立了长远投射轴突末梢Ca2+活动的光学记录方法.与麻醉状态相比,自由活动状态下内嗅-海马通路呈现更强的Ca2+活动发放.
