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大鼠原代视网膜神经节细胞文献资料
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积雪草酸对原代大鼠视网膜神经节细胞低氧损伤的保护作用研究
目的 研究积雪草酸(AA)在体外大鼠视网膜神经节细胞(RGC)低氧损伤中的保护作用,并探讨其作用机制.方法 选取出生1～3d的新生SD大鼠,解剖游离出视网膜,利用Thy1.1抗体包被法纯化获取RGC,定量聚合酶链反应(qPCR)鉴定RGC的纯度.体外给予原代RGC不同时长(0、12、24、48 h)的低氧(1％O2)损伤刺激,TUNEL检测RGC的凋亡情况.预先给予原代RGC不同浓度(0、5、10、20、50 μmol/L)的AA干预后,再以1％O2培养48 h,通过TUNEL凋亡检测、CCK-8细胞增殖检测研究AA在RGC凋亡中的作用.利用Wes全自动蛋白质印迹定量分析系统对凋亡相关蛋白c-Abl进行检测.结果 低氧条件下(1％O2),RGC的TUNEL凋亡阳性细胞数随着低氧刺激时间的递增呈梯度增加.低氧环境下(1％O2),给予不同浓度的AA干预,TUNEL结果显示10 μmol/L和20 μmol/L AA处理后,RGC凋亡细胞数显著减少(P值均＜0.01).同时CCK-8结果显示10 μmol/L和20 μmol/L AA干预后,RGC的增殖活力明显升高(分别为P＜0.05,P＜0.01).Wes全自动蛋白质印迹定量分析系统结果表明,AA在原代RGC低氧损伤中可以明显抑制c-Abl的磷酸化水平.结论 体外低氧刺激时,AA可以减少RGC的凋亡,对原代RGC的低氧损伤有一定的保护作用,其作用机制与抑制c-Abl的磷酸化激活相关.
关键词： 大鼠原代视网膜神经节细胞 积雪草酸 c-Abl 神经保护
