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口腔生物膜动态研究模型的建立和应用评价
目的:模拟口腔菌斑生态环境,建立能够对生物膜形成过程连续观察的动态研究模型.方法:自制发酵罐和多出口连续培养室.以变形链球菌、血链球菌、乳酸杆菌、内氏放线菌为实验菌株,将羟磷灰石片、玻片等置于连续培养室中,通过调节温度、氧分压、pH值、清除率、循环流速及代谢底物等参数建立模型.以25 mM蔗糖和蒸馏水进行系统测试.观察系统中实验菌CFU计数、pH动态变化等各项反应及不同环境下所形成生物膜的微结构变化.所得数据采用SPSS 10.0软件包进行统计学分析,选用单因素方差分析的Dunnet t双侧检验.在α=0.05的情况下比较蔗糖加入组与对照组之间的差异.结果:随着蔗糖的给予,连续培养室中pH表现出相似于天然口腔的致龋环境,蒸馏水组pH值始终维持在7.5左右.而蔗糖组pH值呈明显的周期性波动,低在4.5以下,但4～5h后,其pH值仍能逐步恢复到6.5左右.观察到细菌计数、生物膜形态的时间依赖性.随着处理液的加入.2组生物膜的活菌计数均明显增加,约72h趋于稳定.对120h生物膜,蔗糖组变形链球菌、乳酸杆菌的细菌计数显著高于蒸馏水组(P＜0.05);蔗糖组变形链球菌计数高,而蒸馏水组血链球菌计数高.荧光显微镜观察发现.蔗糖组大量的胞外多糖基质和细菌成团、成片分布;蒸馏水组虽然也存在细菌和基质增多的时间依赖性.但膜细菌基质团块仍清晰可见.结论:本研究建立的体外模型能稳定控制有关参数,各观察指标均具有良好的重复性.模型的建立,实现了生物膜形成过程的动态观察.
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生物膜中不同定植阶段细菌间的相互作用及模型
牙菌斑生物膜是引发口腔龋病和牙周病的重要因素。在牙菌斑生物膜形成过程中，中晚期定植菌并非直接附着于牙面，而是依赖于识别早期定植菌表面的多糖或蛋白受体，因而早期和中晚期定植菌之间的相互作用对生物膜的形成至关重要。近年来，体外生物膜模型被广泛应用于细菌间相互作用的研究，本文就以生物膜为依托的细菌间相互作用及体外生物膜模型的应用作一综述。
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口腔生物膜体外模型的建立和应用评估
目的:通过建立体外生物膜模型,模拟口腔内生态环境以探索生物膜在龋病发生发展中的作用.方法:利用发酵罐与恒流培养室的组合构建简易的体外生物膜模型,通过恒流培养室内液体培养基连续的流动循环,模拟出口腔内液体持续冲刷的生态环境.在羟磷灰石片上定植4种口腔常驻菌,以形成实验性生物膜,并通过每12 h 定时给以蔗糖底物,模拟致龋环境,观察系统中实验菌CFU计数、pH动态变化等各项反应及不同环境下所形成生物膜的微结构变化.结果:本研究建立的系统能较好的控制各项实验参数,加入蔗糖底物后表现出明显的致龋反应.结论:本组建立的体外模型有着良好的可靠性与可重复性,可用于对口腔生物膜的各项体外研究.
