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口腔生物膜体外模型的建立及应用评估
菌斑是多种口腔微生物在牙面上形成的特殊生物膜.各种微生物在这一生物膜中与外界环境发生着生化物质与信息的交流,互相协调生长从而形成复杂的生态环境.国际上先进的模型系统结构复杂,造价昂贵.为此,我们利用现有的技术条件,建立了符合国情的口腔生物膜体外模型.
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荷叶、五倍子提取物对口腔细菌及生物膜影响
目的:初步研究荷叶水提取物、乙醇提取物以及五倍子水提取物对口腔细菌及生物膜的影响,探讨两者防龋应用前景.方法:荷叶、五倍子经提取分别得荷叶水提取物、荷叶乙醇提取物以及五倍子水提取物;将自口内分离所得“口腔细菌”接种于BHI平板,并经上述提取物处理后,计数菌落及测量抑菌圈;在载玻片上定植分离得到“口腔细菌”,以形成生物膜体外模型,再于实验组分别加入经1∶3∶9浓度梯度稀释后的提取物,培养完成后经结晶紫染色,在显微镜下观察摄像,以同质量分数的蔗糖溶液、蒸馏水及乙醇溶液作为对照.结果:五倍子3个浓度梯度的类药敏实验组,均有明显的抑菌圈,荷叶提取物原液1∶3梯度稀释者有较明显的抑菌圈,且其菌落数与纯水组差异有统计学意义(P＜0.05);建立口腔生物膜体外模型,并经显微镜数字摄像系统所摄得图像可见,相比于对照组荷叶水、乙醇提取物及五倍子作用后所形成的口腔生物膜染色均较浅,结构均较稀疏,且其作用随着提取物浓度的增大而增大.结论:荷叶提取物、五倍子可有效抑制口腔细菌;荷叶提取物及五倍子对口腔生物膜形成均有较明显的抑制作用.
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五倍子在体外生物膜模型中对口腔常驻菌形成的致龋生物膜的影响
目的研究五倍子对口腔常驻菌形成的人工致龋生物膜的影响,探讨其防龋应用前景.方法在体外模型中的羟基磷灰石片上定植4种口腔常驻菌,以形成实验性生物膜.实验组定时给予质量浓度4 g/L的五倍子提取物的蔗糖溶液处理生物膜,观察其pH的动态变化,生物膜表面微结构与微生物组成的改变.以同质量浓度的蔗糖溶液与蒸馏水分别作为阳性与阴性对照.结果①实验组培养室内pH值呈先下降,再逐步恢复正常的波浪形变化;②五倍子的加入能抑制变形链球菌对羟基磷灰石片的粘附;③五倍子的加入可使生物膜表面胞外基质的量减少.结论五倍子作为一种潜在的防龋药物可能有着良好的应用前景.
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中药蜂房对口腔常驻菌形成人工致龋生物膜影响的实验研究
目的研究蜂房对口腔常驻菌形成人工致龋生物膜的影响,探讨其防龋应用前景.方法在体外模型中的羟磷灰石片上定植4种口腔常驻菌,以形成实验性生物膜.实验组定时给予含4 g/L蜂房提取物的蔗糖溶液处理生物膜,观察其pH的动态变化,以及生物膜表面微结构与微生物组成的改变.以同浓度的蔗糖溶液与蒸馏水分别作为阳性与阴性对照.结果①实验组培养室内pH值呈先下降,再逐步恢复正常的波浪形变化.②蜂房的加入能抑制变链对羟磷灰石片的黏附.③蜂房的加入可使生物膜表面胞外基质的量减少.结论蜂房作为一种潜在的防龋药物可能有着良好的应用前景.
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口腔生物膜体外模型的建立和应用评估
目的:通过建立体外生物膜模型,模拟口腔内生态环境以探索生物膜在龋病发生发展中的作用.方法:利用发酵罐与恒流培养室的组合构建简易的体外生物膜模型,通过恒流培养室内液体培养基连续的流动循环,模拟出口腔内液体持续冲刷的生态环境.在羟磷灰石片上定植4种口腔常驻菌,以形成实验性生物膜,并通过每12 h 定时给以蔗糖底物,模拟致龋环境,观察系统中实验菌CFU计数、pH动态变化等各项反应及不同环境下所形成生物膜的微结构变化.结果:本研究建立的系统能较好的控制各项实验参数,加入蔗糖底物后表现出明显的致龋反应.结论:本组建立的体外模型有着良好的可靠性与可重复性,可用于对口腔生物膜的各项体外研究.
