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免疫磁珠吸附红细胞悬液中sHLA-Ⅰ和sFasL分子后对其他成份的影响
同种异体输血造成受血者免疫功能抑制,大量研究表明,可溶性HLA-1(sHLA-Ⅰ)类分子和可溶性Fas配体(sFasL)分子是引起输血后免疫抑制的主要原因之一.本文拟通过制备免疫磁珠吸附去除血液中的sHLA-Ⅰ和sFasL分子以减轻输血后免疫抑制的发生,同时监测红细胞悬液中其它成分的变化.
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GW112mRNA3'端非翻译区特异性结合蛋白研究
目的:通过体外实验筛选出与GW112 mRNA 3'非翻译区临床特异性结合蛋白,并研究蛋白性质.方法:以稳定表达GW112基因的胃癌细胞SGC-7901为实验对象,体外转录法获得GW112 mRNA 3'非翻译区片段并用生物素标记,结合亲和素磁珠特异性吸附原理,从细胞总蛋白中纯化出与GW112 mRNA 3'非翻译区特异性结合蛋白.经过质谱鉴定得到蛋白信息,并用Western blot验证结果.结果:用磁珠纯化的蛋白样品经SDS-PAGE电泳后,取目的条带进行质谱分析发现存在核仁素蛋白,以核仁素单克隆抗体进行Western blot验证后发现与质谱结果一致.结论:核仁素是GW112 mRNA 3'非翻译区特异性结合蛋白的一种,并很可能对GW112 mRNA稳定性有直接影响,这为进一步揭示GW112在胃癌细胞抗凋亡机制中的作用奠定基础.
关键词: GW112基因 GW112 mRNA 3'非翻译区 体外转录 磁珠吸附 核仁素