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miR-21反义寡核苷酸对U937细胞中地西他滨抗白血病效应的影响及可能机制
目的 研究miR-21反义寡核苷酸对地西他滨(DCA)抗白血病效应的影响及可能机制.方法 将miR-21反义核苷酸(AMO)和无义寡核苷酸(SCR)通过脂质体转染导入U937细胞,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)验证转染效率,再分别与DCA0.5、2.0和4.0 μmo1·L-1作用48 h.采用qRT-PCR检测人节律基因hPer3 mRNA表达,Annexin V/PI法检测凋亡,流式细胞仪检测CD14和CD11b平均荧光强度(MFI)和细胞周期.结果 AMO转染组的miR-21表达(0.67±0.09)均低于空白组(1.10±0.06)和SCR转染组(1.04±0.08),差异有统计学意义(P＜0.01).AMO转染组的U937细胞DCA的IC50[(2.36±0.26) μmol·L-1]低于空白组[(4.32±0.61) μmo1·L-1]和SCR转染组[(4.02±0.45) μmol·L-1](P ＜0.01).同一浓度下,AMO组的早期凋亡率、CD14 MFI、CD11b MFI、细胞Sub-G1期、hPer3 mRNA均高于同一浓度药物作用的空白组和SCR组,差异均具有统计学意义(P＜0.01).结论 miR-21 AMO能显著促进DCA体外抗白血病效应,其机制可能和hPer3的激活有关.
