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超低温冻存同种异体成骨细胞与异种脱钙骨复合异位组织工程化骨
目的:研究同种异体成骨细胞经超低温冻存后在体内的成骨能力及其免疫反应.方法:体外分离培养SD大鼠颅骨成骨细胞,提纯并传代至第3代时一部分作为对照组用;另一部分采用-196℃超低温冻存,24 h后复苏.将该两种第3代细胞分别与脱细胞并去抗原性的猪脱钙型松质骨(decalcified bone, DB)复合,将两种复合体和单纯DB分别植入SD大鼠背部肌袋内,各24只,4周后取标本,应用组织学、碱性磷酸酶测定、体视学及免疫学测定,观察成骨现象及免疫反应.结果 :经超低温冻存的同种异体成骨细胞异体异位植入后,成骨量、成熟度明显优于未冻存成骨细胞;引起的免疫反应亦低于未冻存细胞.结论:同种异体成骨细胞经超低温冻存、复苏后,抗原性明显降低,未引起强烈的免疫排斥反应,仍具有成骨能力.
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脱基质型松质骨对成骨细胞内游离钙及碱性磷酸酶水平的影响
目的研究猪脱蛋白型松质骨(DPB)、脱钙型松质骨(DB)对成骨细胞内游离钙(Ca2+)浓度、碱性磷酸酶(ALP)活性的影响,探讨这两种材料的生物相容性.方法体外分离培养SD乳大鼠颅骨成骨细胞,纯化后与猪脱蛋白型松质骨、脱钙型松质骨复合,培养7天后测定Ca2+浓度、ALP活性.结果脱钙型松质骨组成骨细胞Ca2+浓度、ALP活性高于脱蛋白型松质骨组及空白组.脱蛋白型松质骨组成骨细胞Ca2+浓度、ALP活性与空白组无明显差异.结论两种材料对细胞内游离钙浓度及碱性磷酸酶活性无不良影响,脱钙型松质骨对于成骨细胞的合成、分泌有促进作用.游离钙浓度及碱性磷酸酶活性能够反映组织工程支架材料的生物相容性,可作为评价组织工程材料生物相容性的指标.