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人羊膜上皮细胞原代培养及肝细胞特异性蛋白的表达
目的 完善人羊膜上皮细胞(AECs)的原代培养技术,检测肝细胞特异性蛋白在AECs中的表达.方法采用胶原酶胰蛋白酶联合消化法分离获取AECs并进行原代培养.分别向培养液中添加10、20、40 ng/mL表皮生长因子(EGF)和10 ng/mL的碱性成纤维细胞生长因子(bFGF),倒置显微镜观察细胞生长和增殖情况,从中选择适宜AECs原代培养的细胞培养液.以培养液中未添加生长因子的原代培养细胞作为对照.将羊膜组织石蜡切片和AECs细胞爬片进行免疫组化染色,检测4种肝细胞特异性蛋白的表达,分别为白蛋白(Alb)、细胞角蛋白-18 (CK-18)、α-1-抗胰蛋白酶(AAT)和α-1-甲胎蛋白(AFP).结果 经胶原酶-胰蛋白酶联合消化法获得大量较纯的AECs,间杂少数间充质细胞.当细胞培养液中添加10 ng/mL EGF时,AECs生长和增殖速度显著加快,故终选择添加10 ng/mL EGF配制细胞培养液.免疫化学染色显示,羊膜组织和体外传代培养的AECs中均有Alb、CK-18、AAT和AFP表达.结论 胶原酶-胰蛋白酶联合消化及培养液中添加10 ng/mL的EGF是AECs较为适宜的原代培养方法.人羊膜组织及体外培养AECs能表达肝细胞特异性蛋白,提示AECs具有肝细胞的部分生物学特性.
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胃癌患者60例血清及黏膜组织CK-18、CDH-17、CA724与CEA检测的临床价值
目的 观察细胞角蛋白-18(CK-18)、肝肠-钙黏连蛋白-17(CDH-17)、糖类抗原724 (CA724)、癌胚抗原(CEA)在胃癌患者血清与胃黏膜组织中的表达水平,探讨联合检测对胃癌诊断的价值.方法 选取经病理明确诊断为胃癌的患者60例(恶性病变组)、胃良性病变60例(良性病变组)和同期门诊健康体检者60例(正常对照组);采用酶联免疫吸附实验检测各组血清CK-18、CDH-17水平,电化学发光法检测血清CA724、CEA,同时采用免疫组化法检测CK-18、CDH-17、CA724、CEA在各组胃组织中的表达.结果 1)恶性病变组血清CK-18、CDH-17、CA724、CEA水平均较正常对照组、良性病变组明显升高(均P＜0.05);2)胃癌组织中CK-18、CDH-17、CA724、CEA的阳性表达率均明显高于正常对照组、良性病变组(均P＜0.05);3)Spearman分析显示:胃癌患者血清CK-18、CDH-17、CA724、CEA水平与胃癌组织中其表达水平呈正相关;4)联合检测CK-18、CDH-17、CA724、CEA在胃癌中的灵敏度和特异度分别为93.3％和81.7％,与单项检测胃癌灵敏度相比较,联合检测胃癌的灵敏度均升高(P＜0.05).结论 检测血清CK-18、CDH-17、CA724、CEA的水平有助于胃癌的诊断,联合检测胃黏膜组织CK-18、CDH-17、CA724、CEA可提高胃癌诊断的灵敏度.
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胃癌患者血清CK-18、CA72-4、CEA的临床意义
目的：探讨胃癌患者血清中细胞角蛋白－18（CK-18）、糖链抗原72-4（CA72-4）和癌胚抗原（CEA）水平及其临床意义。方法随机选取2015年5月到2016年5月常州市金坛区人民医院行胃癌治疗的患者40例作为实验组，所有病例经诊断均未患其他恶性肿瘤（肿瘤位于胃部15例，位于胃窦部9例，位于贲门胃底部16例；另外在门诊随机选取30例健康体检者作为对照组。测定两组人群血清中CK-18、CA72-4和CEA的水平。结果实验组血清中CK-18、CA72-4和CEA阳性表达与胃癌的生物学特征如年龄、性别、肿瘤位置及其大小、淋巴结转移等差异无统计学意义（P＞0．05）；实验组CK-18、CEA、CA74-2浓度（中位数）分别为2．03、2．93、4．34 ng／ml，均显著低于对照组的8．96、8．35、21．68 ng／ml，差异有统计学意义（P＜0．05）。结论 CK-18、CA72-4和CEA三种肿瘤指标联合检测可考虑作为新的胃癌检测指标，对胃癌预防及治疗有一定意义。
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细胞角蛋白-18联合受控衰减参数二步法无创鉴别非酒精性脂肪性肝炎的临床研究
目的 评价细胞角蛋白-18(CK-18)联合受控衰减参数(CAP)二步法无创诊断非酒精性脂肪性肝炎(NASH)的价值.方法 纳入经“肝活组织检查”证实的非酒精性脂肪性肝病65例,其中NASH 30例.CK-18采用M30及M65定量检测酶联免疫吸附(ELISA)试剂盒.FibroScan完成CAP测定.绘制受试者工作特征(ROC)曲线及曲线下面积(AUROC)来判定无创诊断价值.联合诊断采用二分类logistic模型计算预测概率.采用大Youden指数、敏感度＞90％及特异度＞90％分别确定佳临界值、低值及高值. 结果 多因素分析提示,M65 (OR 1.004,95％CI1.002 ～ 1.007,P=0.003)及CAP (OR 1.017,95％CI 1.001 ～ 1.033,P=0.036)是NASH的独立预测因素.M65+CAP组合的AUROC (95％CI)为0.851 (0.761 ～ 0.942),高于M65的0.808(0.702 ～ 0.913)及CAP的0.677 (0.545 ～ 0.808).M65采用高值(820.8 U/L)及低值(527.7U/L),CAP采用佳临界值(293.5 dB/m),进行二步法鉴别NASH,阳性预测值为85.7％,阴性预测值为100％,符合率为92.0％. 结论 M65联合CAP二步法可以提高NASH的无创诊断价值,较高的阴性预测值可以避免不必要的肝活组织检查.
