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GFP表达文献资料
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绿色荧光蛋白GFP在转化细胞和肿瘤细胞中的表达
目的 在肿瘤基因治疗研究中建立一个用绿色荧光蛋白(green fluorescent protein，GFP)为标记基因的合适条件。方法 用带有GFP突变体的质粒转染到表达细胞，观察GFP瞬时表达的情况：1．直接测定GFP在COS-7细胞中的表达并观察表达的稳定性；2．比较不同启动子驱动的pcDNAa-EGFP和pSVKa-S65T两种质粒在不同肿瘤细胞中的转染效率；3．用LacZ基因与GFP基因共转染48h后，通过FACS分选测定两种基因在同一细胞中的表达情况。结果 在不同条件下的活细胞中有GFP基因表达，且表达具有稳定性，表达持续约2周左右；CMV启动子和SV40启动子调控的GFP对不同肿瘤细胞株的转染效率有差异。当两种基因共转染后用FACS分选，选出GFP细胞带有LacZ基因细胞在1：4时可达85％以上。结论 通过GFP表达可连续而直接地观察活细胞中的基因表达，利用GFP可快速地挑选带有靶基因的细胞。
