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不同温补肾阳中药主要组分对小鼠肾上腺皮质瘤细胞增殖及皮质酮分泌的影响
目的:研究温补肾阳中药主要组分对小鼠肾上腺皮质瘤细胞增殖及皮质酮分泌的影响.方法:以Y1小鼠肾上腺皮质瘤细胞为实验对象,分别采用0.2～640 μmol/L淫羊藿苷、仙茅苷、金丝桃苷、松果菊苷、松脂醇二葡萄糖苷、补骨脂素和耐斯糖干预Y1细胞24 ～72 h;并以0.1％ DMSO为对照组,佛司可林为诱导剂组;通过MTT法检测细胞增殖、qPCR检测细胞皮质酮合成酶基因表达、ELISA检测细胞上清液皮质酮水平.结果:Y1细胞铺板0～72 h内,对照组细胞增殖明显,80～640 μmol/L淫羊藿苷治疗72 h显著抑制Y1细胞增殖,且呈现量效关系(P ＜0.05);640 μmol/L松果菊苷治疗24h、48 h和72 h均显著抑制Y1细胞增殖(P ＜0.05);10 ～80 μnol/L补骨脂素治疗48 h显著促进Y1细胞增殖(P＜0.05);大于320 μmol/L补骨脂素治疗72 h显著抑制Y1细胞增殖(P＜0.05);然而,仙茅苷、金丝桃苷、松脂醇二葡萄糖苷、耐斯糖对Y1细胞增殖无明显影响.基础状态下,与对照组比较,仅10 μmol/L补骨脂素显著增强Cyp11 b1基因表达(P＜0.05);佛司可林显著促进各组Star、Cyp11 a1和Cyp11 b1基因表达及皮质酮分泌(P＜0.05).结论:淫羊藿苷、松果菊苷和补骨脂素对Y1细胞增殖抑制作用与其浓度和作用时间有关,本研究中采用的温补肾阳中药主要组分对Y1细胞皮质酮合成与分泌作用弱.
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IL-6对小鼠肾上腺皮质细胞系Y1合成皮质醇的影响
目的:探讨白介素6(IL-6)对小鼠肾上腺皮质细胞系Y1合成皮质醇能力及合成过程中类固醇急性调节蛋白(StAR)相关基因表达的影响.方法:100 ng·ml-1 IL-6单独或联合10-9 mol·L-1促肾上腺皮质激素(ACTH)处理Y1细胞后,台盼蓝拒染法检测细胞活力,放免法检测细胞皮质醇合成量,实时荧光定量PCR法检测StAR mRNA表达水平.结果:IL-6单独或联合ACTH处理Y1细胞后,皮质醇合成量增加(P＜0.05),同时StAR mRNA表达水平上升(P＜0.05).结论:IL-6可单独或联合ACTH通过促进StAR mRNA表达增强Y1细胞合成皮质醇的能力.
关键词： 白介素6 Y1细胞 皮质醇 细胞色素P450侧链裂解酶 -
TNFα对小鼠肾上腺皮质细胞系Y1增殖、凋亡的影响
目的:探讨肿瘤坏死因子α(TNFα)对小鼠肾上腺皮质细胞系Y1增殖、凋亡的影响.方法:不同浓度、不同作用时间的TNFα处理小鼠肾上腺皮质细胞系Y1;MTT法检测细胞的增殖;台盼蓝拒染法检测细胞增殖抑制;流式细胞仪检测细胞的凋亡水平;分光光度法检测细胞caspase8/3的变化.结果:不同浓度的TNFα处理Y1细胞不同时间后,细胞的增殖能力明显下降(P＜0.05);细胞凋亡水平明显提高(P＜0.05);细胞caspase8/3水平明显升高(P<0.05).结论:TNFα可抑制Y1细胞增殖,并通过提高caspase8/3的活性而诱导及促进细胞凋亡.
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佛司可林促进小鼠肾上腺皮质瘤细胞皮质酮分泌的作用研究
目的：研究佛司可林( FSK)对小鼠肾上腺皮质瘤细胞皮质激素的促分泌作用。方法以Y1小鼠肾上腺皮质瘤细胞为实验对象,采用1、10μmol·L-1 FSK处理Y1细胞15 min~24 h等不同时程,观察 Y1细胞生长形态变化,运用ELISA方法检测细胞分泌液皮质酮含量,RT-qPCR方法检测相关基因mRNA表达,Western blot方法检测相关蛋白表达。结果1μmol·L-1 FSK干预Y1细胞3 h后细胞形态开始皱缩并逐渐形成圆球状生长。与对照组比较,1μmol · L-1 FSK治疗24 h后明显升高Y1细胞皮质酮水平( P<0．01)；并增加类固醇急性调节蛋白酶( Star)基因和蛋白表达( P<0．01)、也明显升高皮质酮合成第一步骤限速酶Cyp11a1和皮质酮合成后一步关键酶Cyp11b1基因表达(P<0．01)。此外,10μmol·L-1 FSK干预Y1细胞15 min~12 h不同时程后,发现1 h后即可明显增加Star基因表达,并呈现典型的时效关系(P<0．01)；孤儿核受体(Nr4a1和Nr4a2)基因表达在FSK处理15 min后明显升高、1 h后上调明显( P<0．01),之后升高幅度逐渐减弱。然而,FSK对孤儿核受体(Nr5a1)和促肾上腺皮质激素受体(Mc2r)基因表达无明显影响。结论 Y1小鼠肾上腺皮质瘤细胞对腺苷酸环化酶激活剂佛司可林具有强烈的应答反应,佛司可林是皮质激素分泌的强有效诱导剂。
