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糖原合酶激酶3β和腺瘤性结肠息肉病蛋白在气道上皮细胞机械损伤修复过程的时空分布
为了探讨糖原合酶激酶3β(glycogen synthase kinase 3β,GSK3β)和腺瘤性结肠息肉病(adenomatous polyposis coli,APC)蛋白在气道上皮细胞(airway epithelial cells,AECs)损伤和修复中的作用,我们采用机械划线损伤的方法建立体外气道上皮损伤修复模型,采用Western blot、免疫荧光双标共聚焦成像和免疫沉淀的方法观察损伤修复过程中APC蛋白和GSK3β在AECs中表达及分布的动态变化.结果显示:(1)用Western blot方法观察到划线损伤0.5 h后即有GSK3β磷酸化增强(P＜0.05),6 h达到高峰(P＜0.05),持续到12 h(P＜0.05),24 h开始下降,而GSK3β总量大致保持一致.(2)在免疫荧光双标共聚焦成像实验中,划线损伤0 h组APC蛋白主要表达于胞浆,而划线损伤6 h后APC蛋白主要聚集于损伤前沿区的迁移活跃细胞.(3)免疫共沉淀的实验结果显示,划线损伤0 h时GSK3β和APC蛋白能共同沉淀,但在划线损伤6 h之后,两者发生了分离.以上结果表明:划线损伤后AECs立即启动修复过程,此时GSK3β的活性被抑制,促使APC蛋白游离出来;游离出来的APC蛋白则与微管正极结合,增加了微管的稳定性,从而调节细胞骨架运动,促进气道上皮的损伤修复.
关键词： 糖原合酶激酶3β 腺瘤性结肠息肉病蛋白 气道上皮细胞 损伤修复 -
原发性胃淋巴瘤中APC蛋白的表达及其意义
目的 研究分析原发性胃淋巴瘤(PGL)组织中腺瘤性结肠息肉病(APC)蛋白的表达,以及与临床病理特征的关系,探讨APC蛋白在PGL发生、发展中的作用及意义.方法 选取2006年6月-2011年12月中南大学湘雅医院、湖南省邵阳市中医医院PGL术后患者的临床资料和手术病理标本.采用免疫组织化学法检测45例PGL和30例胃正常黏膜组织中APC蛋白的表达.结果 PGL和胃正常黏膜组织中APC蛋白阳性表达率分别为37.78%和90.0%,差异有统计学意义(P <0.05).PGL组织中有无淋巴结转移和不同临床分期的APC蛋白阳性表达率比较,差异有统计学意义(P <0.05).不同年龄、性别及大体形态的APC蛋白阳性表达率比较,差异无统计学意义(P >0.05).结论 APC蛋白在PGL中低表达,是PGL发生的一个重要原因,提示APC蛋白可作为PGL发生的一个重要检测指标.
关键词： 原发性胃淋巴瘤 腺瘤性结肠息肉病蛋白 免疫组织化学法 -
β-连环蛋白和腺瘤性结肠息肉病蛋白在小鼠牙胚发育中的表达及相互关系的研究
目的 观察β-连环蛋白(β-catenin)和腺瘤性结肠息肉病CAPC)蛋白在胎鼠下颌第一磨牙牙胚中的表达,探讨两者的作用及相互关系.方法 将昆明小鼠按雌雄比2:1合笼,发现阴栓视为妊娠,定为E0.5 d,制作E13.5 d、E14.5 d、E15.5 d、E16.5 d、E17.5 d胎鼠下颌第一磨牙石蜡切片,免疫组化SP法检测β-catenin和APC蛋白的表达与分布.结果 β-catenin在牙胚蕾状期、帽状期、钟状期上皮内均有表达,且随着发育的成熟,其表达逐渐增强,着色于细胞膜、质及核.APC蛋白在蕾状期牙蕾上皮呈强阳性表达,随着牙胚发育其表达逐渐减弱,着色在细胞膜、质.β-catenin与APC蛋白有显著的负相关性(P＜0.01).结论 β-catenin表达于牙胚早期细胞核及细胞质内,提示其参与了牙胚早期的细胞增殖过程.β-catenin与APC蛋白的时空表达有重叠现象,并呈显著负相关,这符合WNT经典信号通路中两者的作用关系.
关键词： β-连环蛋白 腺瘤性结肠息肉病蛋白 牙胚 免疫组化
