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荧光定量PCR检测鼻咽部脱落细胞内EBV-DNA
目的建立荧光定量PCR(FQ-PCR)检测鼻咽部脱落细胞中EBV-DNA的方法.方法以患者鼻咽部脱落细胞内DNA作为样本,以EB病毒基因序列中EBNA1(核抗原1)基因片段作为扩增的靶DNA,同时以人β-珠蛋白DNA片段作为内参照,合成了两对引物,并设计了两个特异的荧光探针,优化了FQ-PCR反应体系,同时对这两个片段进行扩增,每一标本得到两个Ct值:CtE和Ctβ,计算CtE/Ctβ,得到单位细胞EB病毒的相对量.结果临床标本29例中,阳性22例,阴性7例,临床资料证实阳性者全部为鼻咽癌(NPC),阴性者全部为非鼻咽癌.结论建立的FQ-PCR检测鼻咽部脱落细胞中EBV-DNA的方法,能反映单位细胞病毒的复制情况,可用于NPC的筛查,并可能应用于该病的风险评估和疗效观察.
