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血清miR-216a检测在急性胰腺炎诊断及预后监测中的价值
目的 检测急性胰腺炎(AP)患者血清miR-216a的表达水平,探讨其作为AP诊断及预后监测指标的临床应用价值.方法 实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测80例轻症急性胰腺炎(MAP)、80例重症急性胰腺炎(SAP)患者及74例健康人对照血清miR-216a的表达水平.全自动生化免疫分析仪检测各组淀粉酶(AMY)、脂肪酶(LPS)、Ca2、葡萄糖(Glu)、红细胞比容(HCT)、三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)和C反应蛋白(CRP)等指标.ROC曲线及相关性分析评估miR-216a对AP患者的临床应用价值.结果 与健康人对照组[(11.12×10-5(5.83 × 10-5,19.12×10-5)]相比,AP患者血清miR-216a的水平[38.49 ×10-5 (24.05×10-5,62.02×10-5)]明显升高(U=-9.10,P＜0.01).但MAP与SAP患者血清miR-216a水平[分别为36.46×10-5 (22.29×10-5,55.80×10-5),40.44×10-5 (25.84×10-5,65.48×10-5)]差异无统计学意义(U=-0.96,P＞0.05).miR-216a用于鉴别对照组和AP患者的ROC曲线下面积(AUCROC)为0.870(95％ CI:O.825 ～ 0.915),cut-off值为0.61;用于鉴别对照组和MAP患者的AUCROC为0.865 (95％ CI:0.808 ～0.921),cut-off值为0.59;用于鉴别对照组与SAP患者的AUCROC为0.876(95％ CI:0.822 ～0.930),cut-off值为0.66.AP患者治疗好转后,其血清miR-216a的表达水平由[41.88 × 10-5 (24.24×10-5,64.44×10-5)]下降至[20.58 ×10-5 (11.01×10-5,41.91×10-5)],差异有统计学意义(U=5.24,P＜0.01).相关性分析结果显示,AP患者血清miR-216a的表达水平与CRP呈正相关(r=0.215P=0.006).结论 AP患者血清miR-216a水平明显升高,可用于AP辅助诊断及预后监测.
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Hsa-mir-216a真核表达载体的构建及其在胃癌细胞SGC7901/DDP中的表达
目的:构建人mir-216a真核表达载体,实现其在胃癌细胞SGC7901/DDP中的表达,为进一步研究mir-216a的功能打下基础.方法:依据miRBase数据库中pre-mir-216a序列设计引物;PCR扩增pre-mir-216a基因并将其克隆至pGenesil-1载体;将pGenesil-1-hsa-mir-216a质粒转染SGC7901/DDP细胞,RT-PCR及实时定量RCR法检测成熟mir-216a在SGC7901/DDP细胞中的表达.结果:pGenesil-1-hsa-mir-216a质粒经酶切及测序鉴定正确;pGenesil-1-hsa-mir-216a质粒转染进SGC7901/DDP细胞后,RT-PCR检测mir-216a成熟体表达明显增强,实时定量PCR检测S/D/mir-216a组mir-216a成熟体表达较S/D/HK组上调(63.530±0.159)倍(t=1.201,P<0.01).结论:成功构建了pGenesil-1-hsa-mir-216a真核表达质粒,并在胃癌细胞SGC/DDP中高效表达.
关键词： miR-216a 真核表达载体 SGC7901/DDP细胞 转染 -
miR-216a在胰腺癌组织中的表达及临床意义
目的 分析20例胰腺癌及胰腺良性病变组织中miR-216a的表达差异,探讨miR-216a在胰腺癌中表达的临床意义及潜在应用价值.方法 收集14例胰腺癌患者手术标本的癌组织,6例胰腺良性病变组织作为对照.采用Agilent人microRNA寡核苷酸基因芯片(V12.0)在基因组范围内检测20例组织标本的miR-216a表达,并分析其与胰腺癌临床病理参数的关系.结果 胰腺癌组织中miR-216a的表达显著低于胰腺良性病变组织(P=0.000),miR-216a在胰腺癌组织中的表达与患者年龄、性别、吸烟、临床分期、局部淋巴结转移,远处转移、CA19-9浓度、肿瘤分化程度、神经束膜侵犯、脉管侵犯均无相关性(P＞0.05),而与肿瘤T分期具有显著统计学意义(P=0.002).结论 miR-216a在胰腺癌的发生、发展过程可能发挥重要作用,检测miR-216a有望成为胰腺癌新的肿瘤标记物或预后因子.
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急性胰腺炎miR-216a的临床表达及其在胰腺炎诊断中的临床意义
目的：探讨急性胰腺炎miR‐216a的表达与其在胰腺炎诊断中的临床意义。方法选取2014年5月至2015年10月该院收治的急性胰腺炎患者30例作为A组，30例伴有血淀粉酶升高的非急性胰腺炎患者作为B组，选取同期到该院体检的健康者30例作为C组，RNA抽提各组研究对象的血浆标本，并采用反转录‐聚合酶链反应（RT‐PCR）对所有标本的miR‐216a进行检测分析。结果 A组患者的外周血细胞miR‐216a表达明显高于C组（P＜0．05）。而B组患的miR‐216a和C组相比则差异无统计学意义（P＞0．05）。结论急性胰腺炎患者的外周血细胞miR‐216a表达水平升高，可以作为急性胰腺炎临床诊断的一项重要生物标志物，在急性胰腺炎患者的临床治疗中具有较高的临床价值。
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血清miR-216a水平与急性胰腺炎严重程度的相关性研究
目的 探讨血清miR-216a水平与急性胰腺炎(AP)严重程度的相关性.方法 选择广州医科大学附属乐从医院2015年6月至2016年6月收治的轻型急性胰腺炎(M A P组)17例,重型急性胰腺炎(S A P组)23例和经检查无异常的健康成人(对照组)30例,采集血液标本检测淀粉酶活性(AM YA)和血清miR-216a的表达水平,采用Ranson评分、急性生理学及慢性健康状况评分系统(APACHEⅡ)和改良的CT严重(MCTSI)指数来评价AP的严重程度,分析上述指标与血清miR-216a表达水平的相关性.结果 急性期MAP组与SAP组患者血液淀粉酶活性均高于本组恢复期及对照组,差异有统计学意义(P<0.05),且急性期SAP组高于MAP组,差异有统计学意义(P<0.05);急性期MAP组和SAP组血清miR-216a均显著高于该组恢复期及对照组,差异有统计学意义(均P<0.05),且SAP组高于MAP组,差异有统计学意义(P<0.05);miRNA-216a表达水平与Ranson评分、APACHEⅡ评分和MCTSI指数呈正相关(r=0.667,P<0.05;r=0.396,P<0.05;r=0.648,P<0.05).结论 急性胰腺炎患者血清miR-216a表达水平显著高于健康者,表达水平与急性胰腺炎的严重程度呈正相关,对于SAP的诊断具有重要意义.
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miR-216a通过靶向调控PKCα促进胃癌细胞凋亡的研究
目的：本文旨在明确miR-216a是否通过靶向调控PKCα表达而抑制胃癌细胞增殖和促进其凋亡，从而进一步揭示miR-216a的抑瘤分子机制。方法首先构建PKCα3′U T R-荧光素酶报告载体，通过荧光素酶报告检测观察miR-216a对 PKCα3′UTR-荧光素酶活性的影响；将miR-216a模拟物转染胃癌细胞MGC-803，采用Western blot检测PKCα蛋白表达水平；将PKCαsiRNA转染MGC-803，通过MTS细胞增殖活性检测和Annexin V-FITC/PI凋亡实验考察PKCα下调对MGC-803增殖和凋亡的影响。结果荧光素酶报告检测显示，miR-216a能特异性地与 PKCα3′U T R结合，抑制其荧光素酶活性，下调36％。过表达miR-216a的MGC-803 PKCα蛋白表达水平降低。siRNA干扰 PKCα表达能抑制 MGC-803的增殖和侵袭能力，它能部分模拟miR-216a的抑瘤功能。结论 miR-216a通过靶向PKCαmRNA 3′UTR而抑制胃癌细胞增殖和侵袭能力。
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miR-216a在急性胰腺炎患者外周血的表达及临床意义
目的 探讨急性胰腺炎患者外周血细胞微小RNA-216a(miR-216a)的表达及其临床意义.方法 对60例患者急性胰腺炎患者、20例伴有血淀粉酶升高的非急性胰腺炎病例及60例正常对照的血标本进行血浆RNA抽提,并通过RT-PCR进行miR-216a的检测分析,评估血浆miR-216a对急性胰腺炎的诊断效能.结果 胰腺炎患者的外周血细胞miR-216a表达显著高于健康对照者,差异有统计学意义(P＜0.01).而血淀粉酶的升高的非急性胰腺炎病例miR-216a与正常对照比,没有显著性差异(P＞0.05).结论 性胰腺炎患者外周血细胞miR-216a表达水平增高,作为重要生物标志物有可能为急性胰腺炎的断提供一定的依据.
