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铁皮石斛对人正常皮肤成纤维细胞GM0639辐照后微核的影响研究
目的 分析铁皮石斛煎剂作用后人正常皮肤成纤维细胞GM0639微核的变化.方法 通过MTT法测定不同药物浓度及不同药物作用时间对GM0639细胞存活率的影响,MTT法测定相同剂量60Coγ射线辐照后培养24h未加药组和加不同浓度药物组细胞的存活率,通过胞质分裂阻滞法(CB法)计数铁皮石斛煎剂作用联合不同剂量60Coγ射线照射后的微核率(Micronucleus frequency,MNF)和微核细胞率(Micronucleus cell frequency,MNCF),将铁皮石斛煎剂作用的GM0639细胞与单纯照射细胞的微核率和微核细胞率的统计分析结果进行比较.结果 铁皮石斛煎剂在给药浓度0～100mg/mL范围内,铁皮石斛对GM0639细胞没有细胞毒性.4Gy照射后培养24h,随着药物浓度的增加,细胞的存活率均显著增加,加药60mg/mL就可明显提高细胞的存活率.4Gy照射后培养24h,在试验药物浓度为60mg/mL,作用时间为24h时,将CB微核法得到的数据进行回归拟合可以得到药物作用及未经药物作用的剂量效应曲线,比较两组曲线,铁皮石斛作用组的微核率及微核细胞率明显低于单纯照射组(P<0.05).结论 铁皮石斛可以降低辐照后GM063细胞微核率及微核细胞率,铁皮石斛具有较好的抗辐射作用.
关键词： 铁皮石斛 正常人皮肤成纤维细胞 辐射防护 微核 -
H2O2诱导对正常人皮肤成纤维细胞β-catenin、SMP30基因表达的影响
目的 观察过氧化氢(H2O2)对正常人皮肤成纤维细胞(NHSF)β-链蛋白(β-catenin)和衰老标记蛋白30(SMP30)基因表达的影响,探讨H2O2可能诱导NHSF衰老的机制.方法 将传至2～4代的NHSF细胞随机分为2组:对照组和实验组.对照组NHSF细胞未作任何处理.实验组将NHSF细胞培养24 h后,分别给予50(实验1组)、100(实验2组)、150(实验3组)μmol·L-1的H2O2.在1、2、3h后,采用实时荧光定量PCR(FQ-PCR)法检测各组α-catenin、SMP30基因表达的水平,并计算α-catenin mRNA、SMP30 mRNA值.结果 与对照组比较,实验组β-catenin、SMP30基因表达水平和实验1、2、3组1、2、3h时α-catenin mRNA、SMP30 mRNA水平均明显降低(均P＜0.05);与实验2组比较,实验1组1、2、3h时α-catenin mRNA、SMP30 mRNA水平均明显升高,实验3组1、2、3h时 β-catenin mRNA、SMP30 mRNA水平均明显降低(均P＜0.05).β-catenin、SMP30基因的表达对H2O2诱导有较为明显的时间依赖性和浓度剂量依赖性.结论 H2O2处理后NHSF细胞中β-catenin、SMP30基因表达水平明显降低,H2O2可能在诱导NHSF衰老中起重要作用.
关键词： 正常人皮肤成纤维细胞 过氧化氢 β-链蛋白 衰老标记蛋白30 荧光定量PCR
