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T细胞死亡偶联基因8在大鼠局灶性脑缺血-再灌注损伤中的表达
目的 观察大鼠脑缺血-再灌注后缺血半暗带内T细胞死亡偶联基因8( TDAG8)的表达.方法 体重250～280 g的SD成年雄性大鼠36只,随机均分为正常组(C组)、假手术组(S组)和脑缺血-再灌注组(IR组).采用大鼠大脑中动脉内线栓阻断法(MCAO)模型.IR组大鼠缺血2 h后再灌注24 h.再灌注结束后对大鼠进行神经行为学评分并检测大鼠脑缺血半暗带内的TDAG8 mRNA及TDAG8蛋白表达.结果 IR组脑缺血半暗带内TDAG8 mRNA及TDAG8蛋白表达明显高于C组和S组(P＜0.01)；C组与S组之间差异无统计学意义.结论 TDAG8可能参与了大鼠脑缺血-再灌注损伤过程.
关键词： T细胞死亡偶联基因8 脑缺血-再灌注损伤 大鼠 -
siRNA-pool抑制大鼠脊髓背角神经细胞TDAG8的表达
目的 观察siRNA-pool 对大鼠脊髓背角神经细胞 (rat neurons-dorsal spinal cord cells,RNdsc)上T细胞死亡偶联基因8(T-cell death-associated gene 8,TDAG8)表达的影响.方法 设计并合成针对TDAG8的siRNA 3对(siRNA63、siRNA341、siRNA897)及一条带绿色荧光标记的阴性对照siRNA.在阳离子聚合物纳米粒jetPEITM介导下转染RNdsc.RNdsc细胞随机分为正常(normal)组,载体(vehicle)组,阴性对照 (mismatch) 组,siRNA 50、100、200 pmol组.转染24 h 后,荧光显微镜下计算转染复合物的转染效率,用MTT法检测转染复合物的细胞毒性,采用real-time PCR及Western blot测定siRNA-pool的干扰效率.结果 采用jetPEITM作为转染介质转染效率高达98.9%.转染复合物的细胞毒性低,各组细胞成活率差异无统计学意义.siRNA 50、100、200 pmol可剂量依赖性地抑制TDAG8的表达,siRNA 200 pmol组对TDAG8 mRNA表达的抑制率达88%,对TDAG8蛋白的表达抑制率达73%.结论 siRNA-pool 能高效地抑制RNdsc上TDAG8的表达.
关键词： 小干扰RNA 大鼠脊髓背角神经细胞 T细胞死亡偶联基因8 表达 转染复合物 细胞毒性 -
质子敏感性OGR1亚家族及其研究进展
卵巢癌G蛋白偶联受体1(OGR1)亚家族是新近发现的一类对质子敏感的G蛋白偶联受体,它包括诱导细胞停滞于G2/M期的G蛋白偶联受体G2A(G2 accumulation)、T细胞死亡偶联基因8(T-cell death-associated gene 8,TDAG8)、G蛋白偶联受体4(G protein-coupled receptor 4,GPR4)及OGR1,它们相互之间具有40%～50%的序列同源性.一些脂质分子目前被认为是该类受体的配体,并且该类受体还能通过组氨酸残基感知胞外质子或pH值的变化.该亚家族可通过几种异源三聚体G蛋白包括Gs,Gi,Gq及G12/13介导细胞内多种信号通路,与肿瘤的发生、细胞骨架重组、免疫系统和血管系统功能等生理病理过程有关.
