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肾小球白介素-10基因表达的检测及其在狼疮性肾炎分子诊断中的应用
目的:探讨狼疮性肾炎(LN)患者肾活检组织切片中肾小球IL-10 mRNA表达与临床病理的联系,及其在LN分子诊断中的意义.方法:对20例病理证实的Ⅳ型LN患者,运用激光微分离系统分离其肾活检组织切片中的肾小球,提取总RNA,用荧光定量PCR检测IL-10 mRNA的表达.结果:12例患者的肾小球中检测到IL-10mRNA表达.肾小球IL-10 CT比值与尿IL-10水平、血IgG水平和肾小球CD68平均计数呈显著正相关,与血C3水平呈显著负相关.结论:应用激光微分离技术精确获取肾小球检测基因表达,发现肾小球IL-10 mRNA表达与Ⅳ型LN患者的免疫损伤表现及肾小球病理改变特点显著关联.肾小球原位IL-10 mRNA表达的检测为判断LN患者病情,指导治疗提供了新的组织学分子标志.
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激光微分离检测肾组织中病毒DNA在乙型肝炎相关性肾炎分子诊断中的应用
目的:建立应用激光微分离检测肾活检组织切片中乙型肝炎病毒(HBV)DNA的方法,提高乙肝相关性肾炎临床诊断的水平.方法:对11例外周病毒血清学HBsAg、HBcAb和HBeAg阳性、排除其他继发性肾小球疾病,肾活检病理类型为膜性肾病或膜增生性肾病的患者,运用激光微分离系统分离肾活检组织切片中的肾小球和肾小管,以PCR法检测血清HBV-DNA和用免疫组织化学方法检测肾组织HBsAg、HBcAg和HBeAg.结果:6例肾小球HBV-DNA阳性,5例阴性.与肾组织病毒抗原的检测结果对照发现,1例肾组织中未检测到病毒抗原或DNA,2例HBV-DNA阳性而病毒抗原阴性,4例同时检测到病毒抗原和DNA,其余4例仅检测到病毒抗原的沉积.肾组织HBV-DNA检出率(54.5%)低于病毒抗原总的检出率(72.7%).结论:激光微分离结合PCR检测肾组织乙肝病毒DNA,取材精准,快捷高效,重复性好,为临床上乙肝相关性肾炎的诊断提供了一个新的有效的途径.
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应用激光微分离系统分析老年大鼠肾小球、肾小管及小动脉转化生长因子β1的基因表达变化
为了对肾脏不同组成部分进行精细研究,早在80年代人们即开始研究各种微分离方法,90年代激光微分离技术逐渐成熟,特别是90年代后期自动激光微分离系统的问世[1,2],大大推动了对各种疾病发病机制的精细研究,肾脏病的研究也在不断应用此项技术[3,4].