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  • 吉西他滨对食管癌Eca?109细胞株凋亡的影响及其调控机制

    作者:薛晓婕;汪宏良

    目的 探讨吉西他滨(GEM)对食管癌Eca?109细胞株的凋亡及相关差异蛋白表达的影响及可能机制.方法MTT法检测GEM在不同浓度(1、2、4、8、16 μg/ml)及不同时间(12、24 h)下对Eca?109细胞增殖的影响,并计算半数抑制浓度(IC50). 4. 26 μg/ml GEM(处理组)处理Eca?109细胞,另设GEM未处理组,采用流式细胞仪检测24 h后两组凋亡情况;提取两组相应蛋白,采用双向凝胶电泳和基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱( MALDI?TOF?MS)分析鉴定表达差异量较大的蛋白质点,确定蛋白质类型和功能;Western blotting检测两组培养12、24 h后ASC、Mcl?1和Bax?α蛋白的表达;透射电镜观察两组细胞线粒体超微形态结构的改变.结果 GEM对Eca?109细胞增殖抑制呈浓度和时间依赖性,12、24 h的IC50分别为5. 13 μg/ml和4. 26 μg/ml;经GEM诱导Eca?109细胞凋亡的差异表达蛋白分别为Bax?α、ASC和Mcl?1. GEM处理组12、24 h后ASC和Bax?α表达水平均高于GEM未处理组,而Mcl?1表达量则相反,两组差异有统计学意义( P<0. 01).透射电镜结果显示GEM处理组细胞线粒体的超微形态结构发生剧烈变化.结论 GEM能抑制食管癌细胞增殖,促进其凋亡,可能是通过线粒体凋亡通路调节ASC、Mcl?1和Bax?α表达来实现的.

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