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维生素D及其受体对毛囊生长周期调控的研究进展
毛囊是体表不断自我循环的组织器官,形成于胚胎期,出生后逐渐成熟.由角质形成细胞和真皮乳头细胞组成,维生素D受体(VDR)是维持角质形成细胞正常功能的重要组成成分,开启毛囊生长周期.VDR的DNA结合区和活性功能2区在毛囊生长周期中起作用.VDR的经典转录途径是结合配体1α,25二羟维生素D3(VD3),与二聚化搭档维A酸X受体a(RXRa)形成异质二聚体,吸引共激活剂或者共抑制剂,作用于含有VDR反应元件启动子的基因,调节转录.VDR调节毛囊生长周期不需要VD3,但VD3及类似物对毛囊确有一定的作用.VDR的共抑制剂无毛基因、共激活剂MED1及二聚化配体RXRa受损都会导致毛发脱落.毛囊生理主要涉及Wnt信号通路和Shh信号通路,两条通路之间可相互作用,VDR以非经典途径调节这两条信号通路.维生素D的研究较少,VDR的具体作用机制待进一步研究.
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PPARγ及其辅激活子 MED1重组腺病毒的制备与生物学功能分析
目的:制备大量 PPARγ与 MED1腺病毒,探讨其生物学功能。方法以实验室现有的腺病毒原液为材料,用HEK293a 细胞包装腺病毒,CsCl 梯度离心法纯化病毒,A260法测定病毒颗粒,并通过细胞感染、小鼠活体尾静脉注射病毒等实验,用 HE 染色法、Real-time PCR 及免疫组化法进一步鉴定病毒的生物学功能。结果获得 Ad/LacZ、Ad/PPARγ和 Ad/MED1,其浓度分别为2.51×1012、1.57×1012、2.59×1012 VP/mL。C57BL/6J 小鼠经尾静脉注射 Ad/PPARγ,小鼠出现脂肪肝,肝细胞聚集大量脂滴,且 PPARγ mRNA 和蛋白表达显著增加。同样,用 Ad/MED1感染3T3-L1细胞或给小鼠尾静脉注射 Ad/MED1,MED1表达水平都显著升高。结论 Ad/PPARγ、Ad/MED1及对照Ad/LacZ 成功制备,为体外细胞病毒感染以及活体研究 PPARγ与 MED1的基因功能以及网络调控奠定了实验基础。