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替考拉宁产生菌A.teichomycoticus FIM-37发酵条件优化
为了优化替考游动放线菌FIM-37菌株产替考拉宁发酵条件,采用单因素试验和正交试验研究发酵培养基组成,探讨摇瓶发酵的主要影响因子初始pH值、装液量、转速、温度等发酵参数的影响.结果确定了适宜发酵培养基和发酵参数:可溶性淀粉3.0％,葡萄糖1.0％,黄豆粉4.5％,蛋白胨0.5％,磷酸氢二钾0.02％,氯化镁0.05％,硫酸铵0.02％,脯氨酸0.1％,碳酸钙0.3％,初始pH7.5 ～8.0,装液量50 mL/500 mL,种龄40～48 h,接种量5％,摇床转速230 r/min,发酵温度30℃,发酵时间8d.优化后的发酵水平较原工艺提高了40％以上,该优化发酵工艺为替考拉宁的工业化生产奠定了基础.
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热及酸碱处理对A.teichomyceticus FIM 68-66发酵液的影响
目的 为考察温度及酸碱对替考拉宁发酵液的影响.方法 采用加热和酸碱处理A.teichomyceticus FIM 68-66发酵液,以HPLC检测其替考拉宁含量.结果 结果表明热和酸处理显著降低发酵液中的替考拉宁含量,发酵液在不超60℃处理3h时或pH值不低于2.5处理0.5h,替考拉宁损失低于10%;而发酵液调节至pH 9.5-11.5处理2h,其替考拉宁含量明显提高.结论 本研究为替考拉宁提取工艺奠定基础.
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替考拉宁产生菌TA2-2组分高含量菌种的推理选育
以缬氨酸氧肟酸为筛选剂,对替考拉宁产生菌替考游动放线菌(Actinoplanes teichomyceticus)进行了推理选育,获得了发酵总效价和TA2-2组分含量均较出发菌株高的缬氨酸氧肟酸抗性变株98-1-227.传代试验表明菌株98-1-227的遗传特性较稳定.对菌株98-1-227和出发菌株97-5-74的形态、生代特性进行了比较.
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常压室温等离子体诱变选育替考拉宁高产菌株
目的 为选育替考拉宁的高产菌株.方法 采用常压室温等离子体(ARTP)技术对替考拉宁产生菌Actinoplanes teichomyceticus FIM-68的孢子进行诱变,诱变处理的孢子悬液涂布在含替考拉宁致死浓度的培养基平板上培养,获得替考拉宁抗性突变株,通过摇瓶发酵对替考拉宁抗性基因突变株进行筛选.结果 获得一株遗传性状稳定的替考拉宁高产菌Actinoplanes teichomyceticus FIM-68-66菌株,其产替考拉宁能力提高了2倍.结论 这是首次报道采用常压室温等离子体诱变技术有效提高替考游动放线菌产替考拉宁能力,所获得的替考拉宁高产菌株可望用于替考拉宁的工业化生产.
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响应面法优化替考拉宁发酵培养基的研究
目的 通过响应面分析的方法对发酵生产替考拉宁的培养基进行优化,以提高其产量.方法 以一株替考游动放线菌SIIA 04-7-34为试验菌株,采用逐因子实验法确定替考拉宁合成考察因素的参考范围,再采用Plackett-Burman设计法进行培养基的优化.结果 13个实验因子中筛选到3个显著影响因子:葡萄糖、KH2PO4和接种龄.结论 综合评价实验结果表明:优化发酵条件后,替考拉宁发酵产量提高23.3%,实验值与预测值基本相符.
关键词： 替考拉宁 替考游动放线菌 培养优化 响应面分析法(RSA)
