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靶向抗肿瘤肽的构建及其生物学活性研究
目的 构建重组靶向抗肿瘤肽(Citrostatin),研究其生物学活性.方法 构建Citrostatin重组基因,经原核生物表达和纯化获得Citrostatin融合蛋白,通过内皮细胞杀伤实验、细胞毒活性实验、体外管状机构生成抑制实验等分析Citrostatin的生物学活性.结果 Citrostatin融合蛋白经表达、酶切纯化后,目的蛋白纯度达90%以上.Citrostatin 能明显抑制内皮细胞ECV304的增殖(IC_(50)=2.28μmol/L),有效杀伤肿瘤细胞1990及NCI-H640(IC_(50)分别为9.24,2.7μmol/L),并明显抑制体外管状结构的生成.结论 成功构建了重组靶向抗肿瘤肽Citrostatin,细胞和血管水平研究表明该融合肽同时具有抑制肿瘤新生血管的形成和直接杀伤肿瘤的双重活性.
关键词: Citroatatin 融合肤 抗肿瘤药 血管生成抑制 -
汉坦病毒GM04-38株包膜糖蛋白上融合肽的初步确定
目的 初步确定汉坦病毒GM04-38株包膜糖蛋白上潜在的融合肽区域.方法 采用基因定点突变技术将潜在融合肽区域的十个关键氨基酸突变成性质相左的氨基酸,转染Veto E6细胞后,间接免疫荧光(IFA)检测糖蛋白表达,采用Giemsa染色法观察细胞融合现象.结果 在Vero E6细胞中成功表达出糖蛋白,IFA显示关键氨基酸突变前后细胞中均有荧光信号,呈胞浆分布,但细胞融合现象在突变后消失.结论 潜在融合肽区域的十个氨基酸突变均对细胞融合产生明显的影响,提示该段区域很可能是病毒的融合肤.