首页 > 文献资料
-
Stra 6基因克隆及其在U251细胞中的表达定位
目的:从人胎盘cDNA文库中获得Stra 6基因的全长阅读框架,通过融合GFP蛋白的表达观察其在人脑胶质母细胞瘤细胞株U251中的表达定位及形态学影响.方法:应用高保真PCR技术从人胎盘cDNA文库中扩增出特异片段,构建重组真核表达载体pEGFP-N1-Stra6,转染U251细胞,荧光倒置显微镜观察蛋白表达定位及对形态学影响.结果:获得含人Stra 6基因全长阅读框架的重组质粒pEGFP-Stra 6,融合GFP的Stra 6蛋白大多表达于细胞质和细胞膜.可观察到转染后的细胞呈现分化状态.结论:Stra 6基因过表达使U251细胞形态改变,可能在细胞分化中起作用.
-
U251胶质瘤干细胞抗辐射性能研究
目的 从U251细胞株中分离胶质瘤干细胞并探讨胶质瘤干细胞的抗辐射性能.方法 应用无血清培养基悬浮培养法从U251细胞株中分离鉴定胶质瘤干细胞,X线辐射处理72 h后,噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞活性,流式细胞仪及免疫荧光染色法检测辐射前后CD133和三磷酸腺苷结合盒转运体成员2 (ABCG2)的表达.结果 U251细胞株中经过无血清培养可以得到悬浮生长的胶质瘤细胞球,具有较强的自我更新和增殖能力；在细胞球中,有3.17％的细胞表达CD133,1.17％表达ABCG2；9 Gy辐射处理72 h后,CD133表达阳性率上升到13.24％,ABCG2表达阳性率上升到8.76％；辐射处理后,细胞活性随辐射剂量增大而显著下降(P＜0.05).结论 悬浮培养法得到的肿瘤细胞球有小部分是胶质瘤干细胞；X线辐射处理后,细胞活性随辐射剂量增大而显著下降；胶质瘤干细胞表现出更强的抗辐射损伤性能.
-
胶质瘤中MicroRNA-374的表达及其临床意义
目的 研究人脑胶质瘤组织中微小RNA-374 (microRNA-374,miR-374)的表达及其与临床病理特征之间的关系,探讨其在胶质瘤患者中的临床意义.方法 采用RT-PCR法检测85例胶质瘤和30例正常脑组织中的miR-374表达;Kaplan-Meier法分析胶质瘤患者的总生存期;观察慢病毒过表达miR-374载体转染U251和U87细胞株后对肿瘤细胞增殖的影响.结果 胶质瘤组织中miR-374的表达明显下调;miR-374的表达与WHO分级(P=0.008)、Kamofsky评分(KPS) (P=0.021)和生存时间(P:=0.01)显著相关;Kaplan-Meier分析结果表明,miR-374低表达与高表达患者总生存期(P＜0.01)的差异有统计学意义,miR-374低表达的患者预后较差.多因素分析显示胶质瘤中miR-374的差异表达是预测胶质瘤患者预后的独立危险因素(HR:5.75,95％CI:3.56-6.93,P=0.005).体外实验表明,过表达miR-374可以显著抑制胶质瘤细胞的增殖.结论 miR-374在胶质瘤中是低表达的,与胶质瘤患者预后显著相关;miR-374高表达可抑制胶质瘤细胞的增殖.
