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小分子干扰RNA片段逆转KBv200细胞多药耐药的实验研究
目的:研究小分子干扰RNA片段(siRNA)对舌癌多药耐药(MDR)细胞系KBv200细胞的MDR1基因表达及其功能的影响,探讨siRNA作为未来化疗增敏剂的可能性.方法:运用针对MDR1基因序列的siRNA(MDR1-siRNA)在脂质体的介导下转染KBv200细胞;用RT-PCR分析MDR1 mRNA的表达水平;流式细胞术检测P-糖蛋白(P-gp)的表达;荧光分光光度法检测细胞内多柔比星(Dox)的积蓄;MTF法检测KBv200细胞对长春新碱(VCR)和Dox的敏感性变化.结果:MDR1-siRNA作用24和48 h能抑制MDR1基因的表达(P＜0.05),其mRNA水平和P-gp水平均明显下降,同时使KBv200细胞对VCR和Dox的敏感性显著增加(P＜0.01),并显著增加细胞内Dox的蓄积(P＜0.01). 结论:MDR1-siRNA能显著抑制KBv200细胞内MDR1基因介导的MDR.
关键词： 小分子干扰RNA片段 多药耐药 长春新碱 多柔比星 -
lncRNA-AB073614在U251细胞中的表达及对细胞增殖、迁移、侵袭能力的影响
目的 观察脑胶质瘤细胞U251中长链非编码RNA (lncRNA)-AB073614表达变化及小分子干扰RNA片段(si-RNA)转染对其细胞增殖、迁移、侵袭能力的影响.方法 取U251细胞、正常星形胶质细胞NHA,采用Realtime PCR法检测AB073614.随后U251细胞分别加入或不加入si-RNA转染,MTT实验检测细胞增殖情况,细胞划痕实验检测细胞迁移能力,Transwell实验检测细胞侵袭能力.结果 U251、NHA细胞中AB073614表达水平分别为3.57±0.28、1.00±0.17,两者比较,P＜0.05.MTr实验显示,si-AB073614转染的U251细胞存活率低于未转染的(P＜0.05).细胞划痕实验显示,si-AB073614转染的U251细胞迁移能力低于未转染的(P＜0.05).Transwell实验显示,si-AB073614转染的U251细胞穿膜细胞数低于未转染的(P＜0.05).结论 U251细胞中lncRNA-AB073614表达升高,si-RNA转染lncRNA-AB073614能明显抑制其增殖、侵袭、迁移能力.
