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VEGF在HaCaT细胞中的自分泌作用
目的:检测VEGF在皮肤角质形成细胞系HaCaT细胞中可能的自分泌作用.方法:用MTT法,检测不同浓度外源性VEGF165(0,1,5,10,25,50,100 ng/ml)和不同浓度VEGF特异性抑制剂阿瓦斯丁(0,0.063,0.125,0.25,0.50,1.0,2.0 mg/ml)作用下HaCaT细胞增殖的变化;用细胞迁移实验,检测不同浓度VEGF165和0.5 mg/ml阿瓦斯丁作用下HaCaT细胞迁移的变化;蛋白免疫印迹检测10 ng/ml VEGF165和0.5mg/ml阿瓦斯丁作用下HaCaT细胞ERK1/2的磷酸化情况.结果:VEGF165剂量依赖性地促进HaCaT细胞的增殖和迁移能力;而阿瓦斯丁剂量依赖性地抑制其增殖能力,0.50 mg/ml阿瓦斯丁可以显著性降低其迁移能力;10 ng/ml VEGF165显著性促进HaCaT细胞ERK1/2的磷酸化,而对0.5 mg/ml阿瓦斯丁预处理过的HaCaT细胞的ERK1/2磷酸化没有促进作用.结论:VEGF在皮肤角质形成细胞系HaCaT中存在着自分泌作用.
关键词： 角蛋白细胞/药物作用 血管内皮生长因子类/药理学 抗体 单克隆/治疗应用 细胞 培养的 HaCaT细胞 VEGF 阿瓦斯丁 自分泌 -
罗红霉素对IL-22诱导的HaCaT角质形成细胞增殖的影响
[目的]探讨罗红霉素对白介素-22(IL-22)诱导的HaCaT角质形成细胞增殖的影响.[方法]①0、12.5、25、50、100、200 μg/mL的IL-22处理HaCaT细胞48 h后,MTT法检测细胞活力.②0、10、20、40、80、160、320μg/mL的罗红霉素处理HaCaT细胞48 h后,MTT法检测细胞活力.③细胞分为5组:正常对照组,模型对照组(100 μ.g/mL IL-22),罗红霉素低、中、高剂量组(40、80、160 μg/mL+ 100 μg/mL IL-22).MTT法检测各组细胞活力.Western blot检测各组细胞中角蛋白16(K16)、K17表达量.[结果]12.5、25、50、100 μg/mL的IL-22提高HaCaT细胞活力(P＜0.05);10、20μg/mL的罗红霉素显著的提高HaCaT细胞活力(P＜0.01),40、80、160、320 μg/mL的罗红霉素降低HaCaT细胞活力(P＜0.01);与正常对照组比较,模型对照组中K16、K17、Bcl-2表达上调(P＜0.01);与模型对照组比较,罗红霉素低、中、高剂量组中K17表达依次下调(P＜0.01);与正常对照组比较,模型对照组中Bax表达下调;与模型对照组比较,罗红霉素低、中、高剂量组中Bax表达依次上调(P＜0.01).[结论]罗红霉素能通过下调角蛋白表达及调控细胞凋亡相关蛋白表达进而抑制IL-22诱导的HaCaT细胞增殖.
关键词： 罗红霉素/药理学 白细胞介素类/药理学 角蛋白细胞/药物作用 细胞增殖
