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外膜脂蛋白/属特异性抗原文献资料
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问号钩端螺旋体属特异性外膜蛋白LipL41抗原表位预测及免疫学鉴定
目的:预测及筛选问号钩端螺旋体(简称钩体)属特异性外膜蛋白LipL41有效T和B细胞(T/B)联合表位,了解不同基因型LipL41s差异T/B联合表位的免疫反应性差别.方法:采用生物信息学方法预测LipL41/1和LipL41/2分子中T/B联合表位.采用PCR扩增候选T/B联合表位片段,采用噬菌体展示及SDS-PAGE等技术获得含不同T/B联合表位的重组PⅢ.分别以rLipL41/1和rLipL41/2抗血清、黄疸出血群赖型赖株全菌抗血清和钩体患者血清为一抗,采用Western Blot检测各抗血清与各重组PⅢ免疫杂交反应性.结果:根据预测结果选择了LipL41s中8个共有或差异T/B联合表位.经PCR扩增获得了上述T/B联合表位片段.各T/B联合表位片段均准确插入噬菌体PⅢ蛋白N端并有效表达.各抗血清均能识别上述8个T/B联合表位,但其Western Blot杂交信号强度存在差异,其中共有T/B联合表位LipL41/1-30和LipL41/1-233与不同抗血清的信号较强且稳定.结论:所选择的8个T/B联合表位均为LipL41的有效抗原表位.共有T/B联合表位LipL41/1-30和LipL41/1-233可作为钩体MAP疫苗的首选抗原表位.差异T/B联合表位LipL41s-89和LipL41s-299与不同抗血清有免疫交叉现象.
