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JAK/STAT6文献资料
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高通量筛选JAK-STAT6信号传导通路抑制剂方法的初步建立
目的 构建可用于高通量筛选JAK/STAT6信号传导通路抑制剂的工程细胞株,建立稳定可靠的筛选方法.方法 利用基因重组和转染技术,将STAT6特异性识别启动子IgE基因序列和虫荧光素酶报告基因联合插入pGMV质粒,脂质体法转染至HeLa细胞,经潮红霉素B抗性筛选及报告基因检测,得到稳定表达虫荧光素酶的工程细胞株.通过优化溶剂DMSO浓度,IL-4作用浓度及孵育时间等筛选条件,建立了可靠的筛选方法,并在此基础上对1600种化合物进行了筛选.结果 建立的筛选方法稳定可靠,系统Z'因子达到0.64.通过对1 600种化合物的筛选,得到3个抑制效果较理想的化合物并测得其IG50值.结论 所建立的高通量筛选方法可用于JAK/STAT6信号传导通路抑制剂的筛选.
