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  • 小鼠β防御素2在MDCK细胞中的表达和抗流感病毒活性研究

    作者:巩天祥;冯伟;李婉宜;张强;戴军;裴德翠;蒋忠华;李明远

    目的 探索小鼠β防御素2(mouse β-defensin 2,mBD2)表达载体在狗肾传代细胞(Madin-Darby canine kidney,MDCK)中的表达和抗甲型流感病毒(influenza A virus,IAV)活性.方法 将真核表达载体pcDNA3.1/mBD2利用脂质体法转染MDCK细胞,G418筛选得到稳定转染的阳性细胞,用RT-PCR方法鉴定目的基因和免疫荧光法鉴定目的蛋白在转染细胞中的表达.用TCID50测定转染细胞的抗IAV活性.用pcDNA3.1/mBD2质粒免疫小鼠,观察死亡保护率.结果 pcDNA 3.1/mBD2转染MDCK细胞后在细胞中稳定表达,转染细胞的TCID50比对照组的病毒效价降低近77.98倍;重组质粒免疫小鼠后,死亡保护率为55.55%.结论mBD2能够在MDCK细胞中稳定表达,并且在体外及体内实验中显示出抗流感病毒活性,该结果为抗流感病毒制剂研究奠定了实验基础.

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