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O-SP文献资料
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肠出血性大肠杆菌O157∶H7脂多糖抗原的提取鉴定及间接ELISA法的建立
目的 提取并纯化具有强免疫反应性和高特异性的肠出血性大肠杆菌O157∶H7(E.coli O157∶H7)脂多糖(LPS)抗原,并研究其在E.coli O157∶H7 LPS抗体检测中的应用.方法 应用热酚水法提取E.coli O157∶H7 LPS抗原,同时收集水相和酚相LPS,并对其产率、纯度及免疫反应性进行分析比较,用酸解法制备O-特异性多糖(O-SP),并以不同的LPS为包被抗原,建立间接ELISA法检测E.coli O157∶H7 LPS 抗体.结果 大分子量的 E.coli O157∶H7 LPS优先溶于酚相,而水相中含有更多的小分子量LPS,与水相LPS相比酚相LPS具有更高的免疫反应性和纯度,酚相LPS经酸解去脂得到的O-SP具有更高的反应特异性.结论 酚相LPS和O-SP都可用于E.coli O157∶H7 LPS抗体的ELISA检测,O-SP具有更高的特异性,是检测E.coli O157∶H7 LPS 特异性抗体的理想材料.
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甲型副伤寒沙门氏菌LPS提取和O-SP纯化
提取甲型副伤寒沙门氏菌脂多糖(LPS)和纯化特异多糖(O-SP),为制备副伤寒结合疫苗奠定基础.采用大罐培养,菌体热酚法提纯去蛋白,乙醇分级沉淀冷冻离心去核酸,乙酸水解脱毒,高速离心,柱层析等方法纯化.纯化O-SP核酸含量低于1%,蛋白含量低于1.5%,O-乙酰基含量0.5～0.8mmol/L,与甲型副伤寒超免血清形成明显沉淀线,核磁共振图谱(NMR)显示甲型副伤寒O-SP的特征谱.建立了实用的纯化甲型副伤寒O-SP工艺.
