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Heartland病毒文献资料
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Heartland病毒血清学诊断方法的初步建立
目的 初步建立Heartland病毒血清学诊断方法.方法 利用原核表达系统及杆状病毒-昆虫细胞表达系统表达并纯化Heartland病毒核蛋白(Nucleocapsid protein,NP),通过间接免疫荧光法、间接ELISA法及基于Luminex技术的荧光微球法建立Heartland病毒核蛋白IgG抗体血清学检测方法,并利用原核系统表达纯化的Heartland NP所制备的兔免疫血清进行评价.结果 原核及真核两系统纯化后的Heartland病毒核蛋白经SDS-PAGE鉴定,均呈现单一蛋白条带,相对分子量约为25 kDa.Heartland NP兔免疫血清经间接免疫荧光检测,其IgG抗体滴度可达1:6 400;经间接ELISA法检测可达1∶409 600以上,经Luminex荧光微球法检测可达1∶4 096 000.上述3种方法检测EV 71 VP1兔免疫血清,均无明显非特异性反应.结论 本研究初步建立了3种Heartland病毒血清学诊断方法,需进一步完善以应用于实验室诊断.
关键词： Heartland病毒 荧光微球 血清学诊断
