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亚MIC剂量的甲硝唑和万古霉素对中国株A-B+艰难梭菌毒力转录和表达的影响
目的 艰难梭菌是医院获得性感染性腹泻的主要原因.有些抗生素能够诱导和促进艰难梭菌相关性腹泻(CDAD).本研究探讨治疗CDAD的一线药物甲硝唑和万古霉素的亚小抑菌浓度(MIC)剂量对中国艰难梭菌A-B+高分离株BJ08生长、毒力基因转录和毒素分泌的影响.方法 BJ08菌株分别生长在含有1/4 MIC的甲硝唑或万古霉素以及无抗生素的BHI液体培养基中.每4 h通过检测其OD值以确定其生长曲线;通过实时荧光定量PCR检测其毒力基因的表达;通过ELISA检测上清和细胞内B毒素的表达.结果 实验发现BJ08在1/4 MIC剂量的甲硝唑和万古霉素存在的情况为,到达指数生长期的时间延迟;毒力基因及其毒素的表达增高且提前;但甲硝唑和万古霉素对其影响的程度不同.结论 实验证明中国株A-B+在亚 MIC剂量抗生素存在的情况下,其生长延迟,毒力基因和毒素表达提前且升高.本实验为临床规范治疗CDAD与合理用药提供一定的参考价值.
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中美艰难梭菌A-B+株毒力编码区域转录及B毒素表达的研究
目的 研究中国艰难梭菌A-B+型分离株BJ08和美国艰难梭菌A-B+型暴发流行株US1的毒力编码区域PaLoc各基因转录及B毒素的表达,为预防和控制中国可能暴发的艰难梭菌感染提供理论支持.方法 每隔3h提取BJ08与US1艰难梭菌和培养上清,用荧光定量聚合酶链反应(PCR)法测定各时间段两菌株毒力编码区域PaLoc各基因(tcdA、tcdB、tcdC、tcdR、tcdE)的表达;用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测BJ08和US1各时间段的细胞和培养液上清中B毒素的含量.结果 US1的生长速率稍快于BJ08,衰退速率显著快于BJ08(P＜0.05);它们都不表达A毒素,但是都检测到tcdA基因的转录,而且tcdA转录没有明显差异.BJ08的tcdB、tcdC和tcdE基因的转录要比US1早3h.B毒素在两种菌株的胞内和胞外合成或分泌没有明显差异.结论 中国艰难梭菌A-B+型高分离株BJ08与美国艰难梭菌A-B+型暴发流行株US1相比,有相似的毒力表达或更强的基因调控能力,要警惕中国艰难梭菌BJ08暴发流行的可能.
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克雷霉素、头孢噻肟对艰难梭菌毒素转录和表达的影响
目的 研究1/2小抑菌浓度(MIC)剂量的克雷霉素和头孢噻肟对中国艰难梭菌A-B+高分离株BJ08的生长、毒力基因转录和毒素分泌的影响.方法 BJ08菌株分别生长在含有1/2 MIC的克雷霉素或头孢噻肟以及无抗生素的脑心浸液肉汤(BHI)液体培养基中.每4个小时,通过检测其OD值以确定其生长曲线；通过实时荧光定量PCR检测其毒力基因的表达；通过酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测上清和细胞内B毒素的表达.结果 BJ08在1/2 MIC剂量的克雷霉素存在的情况下,菌株的生长和毒素表达几乎不受影响；但是在1/2 MIC剂量的头孢噻肟存在的情况下,菌株生长变慢,到达对数期的时间延迟；毒力基因和B毒素的表达提前且增加.结论 实验证明:在亚MIC剂量的不同的抗生素存在的情况下对中国株A-B+艰难梭菌的生长和毒力基因表达影响不同.我们的研究对于临床医师规范治疗CDAD和合理应用抗生素有一定的参考价值.
