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无细胞表达系统文献资料
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鼠PrP的无细胞表达及其多克隆抗体的制备
目的 成功的表达鼠的PrP,制备特异性的兔抗PrP多克隆抗体.方法 以BALB/c小鼠肝脏基因组DNA作为模板运用PCR技术成功扩增了PrP23-231,将其克隆到pRSET原核表达载体中,构建重组表达载体pRSET PrP23-231.将该重组载体进行无细胞表达,然后对成功表达的PrP进行纯化,然后用纯化的蛋白免疫新西兰大耳白兔制备其多克隆抗体,并进行Western-blot鉴定.结果 通过Western-blot鉴定,有约30 kD的目的 条带,证明蛋白成功表达,并进行其多克隆抗体的制备并进行Western-blot鉴定,有约30 kD的目的 条带,证明成功制备了PrP的多克隆抗体.结论 成功表达了PrP23-231,并且成功制备了其多克隆抗体,为进一步研究PrP的功能奠定了基础.
