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HBVX基因在HL-7702肝细胞中的表达促进细胞凋亡并上调HSP70基因的表达
目的研究乙型肝炎病毒X（HBVX）基因在肝细胞HL-7702中的稳定表达对其细胞凋亡和表达HSP70的影响，并探讨二者之间的关联。方法将已构建好的HBVX基因真核表达载体pcDNA3-X转染人肝细胞HL-7702，48h后经G418筛选出稳定表达HBVX基因的肝细胞株（L02/HBx）。RT-PCR、蛋白印迹实验鉴定L02/HBx细胞HBVX基因的稳定表达。以转染空质粒肝细胞（L02/pcDNA3）为对照，运用流式细胞分析、TUNEL分析和DNA ladder观察检测L02/HBx细胞凋亡情况。基因芯片技术筛查L02/HBx和L02/pcDNA3两组肝细胞差异表达的凋亡相关基因，并运用蛋白印迹实验技术对差异表达的HSP70基因进行蛋白水平验证。
结果RT-PCR和蛋白印迹实验显示，L02/HBx细胞中有HBVX基因mRNA和蛋白的表达。流式细胞和TUNEL分析显示，L02/HBx细胞组的凋亡率显著高于对照组L02/pcDNA3，DNA ladder可观测到L02/HBx的凋亡现象，而对照组未观测到。两次基因芯片结果筛查出L02/HBx细胞组与对照组差异表达基因HSP70，蛋白印迹实验进一步证实HSP70在L02/HBx细胞中的蛋白表达显著高于未表达X基因的肝细胞组。结论HBVX基因在肝细胞HL-7702中的表达促进了肝细胞的凋亡，上调了肝细胞中HSP70基因的表达，从而在乙型肝炎病毒致肝细胞癌变的过程中起重要作用。 -
热休克蛋白70在前列腺癌中作用机制的研究进展
热休克蛋白(heat shock protein,HSP)是存在于动物体内的一类高度保守应激蛋白.HSP70是热休克蛋白家族中含量丰富的一种,它可以影响蛋白质的折叠和稳定,并且积极参与蛋白质运输和转录调控过程.在肿瘤细胞中,HSP70常表现为高表达.HSP70的细胞保护作用,是肿瘤细胞赖以生存的基础.通过抑制HSP70基因的表达,前列腺癌细胞的生长发育会受到明显的遏制.目前,HSP70可以作为临床上治疗前列腺癌的一个新的靶点.本文探讨HSPs及HSP70的结构和生物学作用,并总结HSP70在前列腺癌发展中所扮演的角色和主要作用机制.
关键词： 前列腺肿瘤 HSC70热休克蛋白质类 -
HSP70、HO-1和HSP27对大鼠精索静脉曲张生精功能的保护作用
目的 探讨HSP70、HO-1和HSP27在大鼠精索静脉曲张(varicocele,VC)过程中对生精功能的保护作用.方法 选取成年雄性SD大鼠40只随机分为4组,每组10只:假手术组(A组),假手术+槲皮素组(B组),VC组(C组)以及VC+槲皮素组(D组).C组和D组大鼠分别建立精索静脉曲张模型,D组同时腹腔注射槲皮素(100 mg/kg).HE染色观察睾丸组织病理改变;测定丙二醛(MDA)、超氧化物岐化酶(SOD)含量;采用原位缺口末端标记检测细胞凋亡指数;免疫组化检测睾丸组织中HSP70的表达情况;RT-PCR检测HSP27,HO-1 mRNA表达水平.结果 D组严重影响了睾丸结构及生精功能,明显加重了VC引起的组织学损伤;凋亡指数分别为(5.26±0.45)％、(5.83±0.52)％、(14.64±0.98)％、(25.37±1.46)％;SOD活性分别为(0.96±0.06)、(0.88±0.05)、(0.45±0.04)、(0.23±0.03) U/mg蛋白,MDA含量分别为(2.24±0.35)、(2.69±0.32)、(4.78±0.41)、(7.37±0.68) nmol/g蛋白;C组中HSP70阳性表达较A和B组明显增多,D组阳性表达较C组明显减少;与A和B组相比,C组中HSP27、HO-1 mRNA表达水平明显增高.和C组比较,D组中表达水平明显减低.B、C和D三组上述指标相互比较均有统计学意义(P＜0.05).结论 HSP70、HO-1和HSP27可减轻氧化应激水平,发挥抗凋亡作用,从而对大鼠精索静脉曲张生精功能产生保护作用.
