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miR-140-5P参与调控颈椎软骨终板退变
目的：探讨表达谱芯片初步分析 microRNA差异表达是否参与调控颈椎软骨终板退变。方法选择25例颈椎软骨终板退变、需要行手术治疗的患者为病例组，15例无椎间盘软骨终板退变患者为对照组。选取病例组2例和对照组2例标本进行microRNA芯片差异表达分析。然后采用miRCURYTM LNA 18．0表达谱芯片进行原位杂交，由 Axon GenePix 4000B microarray扫描仪采集芯片荧光值。芯片结果经病例组15例和对照组15例标本进行 Real-time PCR和Western blot验证。结果病例组发现22个上调和19个下调 microRNA。Real-time PCR验证：病例组miR-140-5P表达量低于对照组的3倍、miR-140-5P的靶基因 Adamts-5和 Dnpep的表达量分别高于对照组的3倍和3．5倍（均P＜0．05）。miR-140-5P 与 Adamts-5和 Dnpep 的 miRNA表达呈负相关（r＝-0．84、-0．76，均P＜0．05）。Western blot结果示：病例组软骨终板 Adamts-5和 Dnpep的蛋白表达分别为0．66±0．46和0．57±0．32，均高于对照组软骨终板的0．22±0．06和0．26±0．08（均P＜0．05）。结论本研究首次报道了 miR-140-5P参与调控颈椎软骨终板退变。进一步研究miR-140-5P不仅有利于揭示软骨终板退变的分子生物学机制，而且其日后也可能成为治疗椎间盘退变的有效靶工具。
关键词： miR-140-5p 软骨终板退变 microRNA 芯片 -
miR-193b对胃癌细胞浸润和转移的影响
目的 探讨 miR-193b 转染对胃癌细胞浸润、转移的影响及其作用机制.方法 应用microRNA 芯片检测 TGF-B1 处理胃癌细胞 BCC823 前后 miRNA 的差异表达谱;应用划痕实验,transwell迁移浸润及裸鼠成瘤等实验分别检测瞬时转染 miR-193b 抑制剂前后胃癌细胞株生物学行为的变化.结果 TGF-β1 处理胃癌细胞 BGC823 前后 miRNA 的表达谱存在 6 个差异表达,包括 3 个(miR-27a,miR-29b-1 和 miR-194)表达上调,3 个(miR-193b,miR-574-3P 和 miR-130b)表达下调.转染 miR-193b 抑制剂后,胃癌细胞株 BGC823 迁移、浸润和转移的能力明显增强.结论 TGF-β1 可能通过下调 miR-193b 的表达负向调控胃癌细胞的迁移、浸润和转移.
