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结直肠腺瘤-腺癌发展序列中差异表达miRNAs的筛选及初步验证
目的 筛选及初步验证结直肠腺瘤-腺癌发展序列中差异表达的miRNA,初步探索其可能机制.方法 MicroRNA芯片检测15例结直肠腺瘤患者、3例结直肠早癌患者和3例健康对照者血清中差异表达的miRNA.在18例结直肠腺瘤,9例结直肠早癌,5例进展期癌及5例正常对照者中用实时荧光定量PCR进行初步验证.结果 早癌组与腺瘤组比较,差异表达的miRNA有15个;早癌组与正常组比较,差异表达的miRNA有13个.选择miR-204、miR-193b与miR-150进行初步验证.进展期癌组血清miR-150表达显著低于正常对照组(P＜0.05);早癌组、进展期癌组血清miR-204表达均显著低于正常对照组(分别为P＜0.05,P＜0.01).腺瘤组、早癌组和进展期癌组血清miR-193b表达均显著低于正常对照组(分别为P＜0.05、P＜0.01、P＜0.05).miR-193b mimic转染HCT116细胞后显著抑制其增殖(P＜0.05),促进其凋亡(P ＜0.001).并可显著抑制K-ras与β-catenin蛋白的表达水平.结论 血清miR-204与miR-193b可能成为诊断结直肠癌的生物标志物,miR-193b可能在腺瘤-腺癌序列中发挥抑癌作用.
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miR-193b 在肝细胞肝癌中的作用研究
目的：探讨 miR-193b 对肝细胞肝癌生物学行为的影响。方法收集48例肝细胞肝癌及对应癌旁组织标本，应用实时定量反转录聚合酶链反应（RT-PCR）的方法检测标本中 miR-193b 的表达。培养肝癌细胞 HepG2及 SMMC-7721，检测两种细胞中 miR-193b 的表达。用脂质体2000将 miR-193b 模拟物及相应的阴性对照组片段转染 HepG2及 SMMC-7721细胞，以未转染组作空白对照；用 MTT 法测定各组肝癌细胞的增殖能力；用流式细胞术检测各组肝癌细胞的凋亡情况。结果 miR-193b 在肝癌组织中的表达水平（2.441±0.569）明显低于癌旁组织（15.488±4.326）（P＜0.05）。与正常肝细胞 L-O2相比较，miR-193b 在肝癌细胞 HepG2及 SMMC-7721中的表达水平也明显降低。转染 miR-193b 模拟物后， HepG2及 SMMC-7721细胞增殖能力明显降低，细胞凋亡增加。结论 miR-193b 可能负向调控肝细胞肝癌的增殖，并增加其凋亡。
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miR-193b对子宫内膜癌侵袭的影响
目的 探讨miR-193b对人子宫内膜癌细胞侵袭的影响及其机制.方法 人子宫内膜癌细胞HEC-1A细胞转染miR-193b抑制剂(miR-193b inhibitor) 24h后,利用Transwell小室评价分析其侵袭能力的变化.进一步,我们利用Western blot验证侵袭相关基质金属蛋白酶(matrix metalloprotease,MMP)-2、MMP-9蛋白的表达.结果 miR-193b inhibitor有效抑制HEC-1A细胞细胞内miR-193b表达,并且其侵袭能力较对照组明显下降(P＜0.05).Western blot验证miR-193b inhibitor可有效抑制MMP-2、MMP-9蛋白表达.结论 miR-193b通过可调节侵袭相关MMP-2、MMP-9蛋白表达有效调控HEC-1A细胞细胞侵袭能力.
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MiR-193b体外协同增强顺铂对宫颈癌细胞的抗肿瘤效应
目的:研究microRNA-193b (miR-193b)是否能增强顺铂对宫颈癌细胞的杀伤活性并探讨其机制.方法:用RT-qPCR方法检测宫颈癌患者及健康对照者病理组织标本的miR-193b表达水平.MTT法检测miR-193b联合顺铂对宫颈癌细胞系Hela的杀伤活性.利用生物信息学、定量PCR及Western blot方法验证miR-193b是否调节宫颈癌细胞Mcl-1的表达.构建Mcl-1真核表达载体,MTT法检测Mcl-1表达载体转染对miR-193b联合顺铂治疗宫颈癌疗效的影响.结果:宫颈癌患者病理组织miR-193b表达水平显著低于对照组病理组织.miR-193b联合顺铂治疗组对Hela细胞的杀伤活性显著高于顺铂单治疗组.miR-193b转染后,Hela细胞Mcl-1的mRNA表达水平及蛋白表达水平均下降.miR-193b联合顺铂在Mcl-1表达载体转染后对Hela细胞的杀伤活性显著低于未转染Mcl-1表达载体的miR-193b联合顺铂组.结论:MiR-193b可能通过靶向于Mcl-1增强顺铂对宫颈癌细胞的杀伤活性.
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miR-193b在胃癌细胞中对uPA的调控作用及机制
目的:探讨胃癌细胞中miR-193b对根据靶基因预测选出的纤溶酶原活化因子(uPA)的调控作用及机制.方法:胃癌BGC823细胞分别瞬时转染miR-193b正义序列(正义序列转染组),反义序列(反义序列转染组)及无意义序列(阴性转染组),以无转染的BGC823细胞为空白对照.用real-timePCR检测各组转染后miR-193b的表达水平,RT-PCR和Western blot法检测各组细胞uPA mRNA和蛋白的表达水平.结果:与空白对照组比较,阴性转染组miR-193b表达水平未见明显改变(P＞0.05),正义序列转染组的miR-193b的表达水平明显上调,反义序列转染组miR-193b的表达水平明显下调(均P＜0.05);各转染组uPA mRNA表达水平均无明显变化;阴性转染组uPA蛋白表达水平无变化,正义序列转染组uPA蛋白表达水平降低,反义序列转染组uPA蛋白表达水平增加.结论:uPA可能是miR-193b的靶基因,miR-193b可能通过抑制其转录后翻译负向调节其表达,从而利于胃癌细胞的侵袭.
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miR-193b对胃癌细胞浸润和转移的影响
目的 探讨 miR-193b 转染对胃癌细胞浸润、转移的影响及其作用机制.方法 应用microRNA 芯片检测 TGF-B1 处理胃癌细胞 BCC823 前后 miRNA 的差异表达谱;应用划痕实验,transwell迁移浸润及裸鼠成瘤等实验分别检测瞬时转染 miR-193b 抑制剂前后胃癌细胞株生物学行为的变化.结果 TGF-β1 处理胃癌细胞 BGC823 前后 miRNA 的表达谱存在 6 个差异表达,包括 3 个(miR-27a,miR-29b-1 和 miR-194)表达上调,3 个(miR-193b,miR-574-3P 和 miR-130b)表达下调.转染 miR-193b 抑制剂后,胃癌细胞株 BGC823 迁移、浸润和转移的能力明显增强.结论 TGF-β1 可能通过下调 miR-193b 的表达负向调控胃癌细胞的迁移、浸润和转移.
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MiR-193b在肝癌组织中的表达及临床意义
观察microRNA-193b(miR-193b)在肝癌组织中的表达,并探讨其临床意义.采用荧光实时定量PCR(qRT-PCR)检测40例肝癌组织及相应的癌旁非肿瘤组织标本中miR-193b表达,分析miR-193b表达与患者年龄、性别、肿瘤大小、分化程度、TNM分期及淋巴结转移等临床病理参数的关系,并比较miR-193b高、低表达患者5年生存率.结果显示,相对于癌旁非肿瘤组织,肝癌组织中miR-193b表达水平明显降低(P<0.01),miR-193b表达与肿瘤分化程度、TNM分期和淋巴结转移相关(P<0.05),与年龄、性别、肿瘤大小无相关性(P>0.05);与miR-193b低表达组患者相比,高表达组患者5年生存率明显增加(P<0.05).MiR-193b在肝癌组织呈低表达,可作为评估肿瘤恶性程度及判断预后的分子标记物.
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血清外泌体miRNA-193b诊断阿尔茨海默病的价值
目的 探讨血清外泌体miR-193b在阿尔茨海默病(AD)早期诊断的应用价值.方法 以2015年9月至2016年8月就诊于首都医科大学宣武医院的患者为研究对象,使用荧光定量PCR法检测主观认知障碍(SCD)、轻度认知障碍(MCI)、痴呆期(DAT)患者及正常对照组血清外泌体miR-193b水平并进行组间比较,用ROC曲线来评价分析miR-193b对SCD的诊断能力.结果 SCD、MCI和DAT患者血清外泌体内miR-193b水平均低于对照组,且DAT组低于MCI组,MCI组低于SCD组,差异有统计学意义(P<0.05).诊断SCD时,AUC为0.947(95％CI:0.886～0.981),当诊断临界值为1.83时,特异度为94.7％,灵敏度为83.3％.结论 血清外泌体miR-193b有望成为AD早期诊断的生物标志物.
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MicroRNA-193b对K562细胞bcr/abl表达的影响
目的 用Ad-pre-miRNA-193b重组腺病毒感染K562细胞,探讨miR-193b在细胞中过表达对bcr/abl表达的影响.方法 将前期构建的Ad-pre-miRNA-193b重组腺病毒感染K562细胞后,采用荧光定量PCR (qRT-PCR)检测miR-193b的表达;qRT-PCR检测bcr/abl融合基因的表达;Westem blot检测BCR/ABL融合蛋白的表达;CCK-8检测K562细胞的增殖情况,流式细胞术(FCM)检测K562细胞凋亡率.结果 与对照比较,K562细胞感染Ad-pre-miRNA-193b重组腺病毒后,miR-193b表达明显升高;bcr/abl融合基因及BCR/ABL融合蛋白表达明显下调;K562细胞增殖能力明显降低(P＜0.05),凋亡水平明显升高(P＜0.05).结论 miR-193b可下调bcr/abl表达,抑制K562细胞的生物学效应,过表达miR-193b能作为治疗CML的有效手段.
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miR-193b与肿瘤相关性的研究进展
miRNAs已被证实是基因表达的关键调控因子,不同水平的表达与各种疾病相关.大多数的研究表明,miRNAs表达谱中的miR-193b参与机体多种病理生理过程,在肿瘤发生、发展过程中发挥抑癌基因的作用,可抑制肿瘤细胞增殖、迁移和侵袭能力.因此,miR-193b在疾病的诊断、治疗和预后评估等方面将会发挥更大的作用,有着广阔的应用前景.本文就miR-193b与肿瘤相关性研究进展作一综述.
