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转染效率和安全性文献资料
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重组腺病毒载体转染ApoE-/-小鼠的安全性评价和在主动脉血管组织的表达情况
腺病毒介导的脂联素过表达对ApoE-/-小鼠动物的安全性检测.将48只普通饮食饲养的12周龄雄性ApoE-/-小鼠分为对照组和脂联素干预组,每组24只.对照组给予一次性尾静脉注射生理盐水100μl;干预组则同法注射100μl重组腺病毒(Ad-APN-eGFP,3.0×l08 p.f.u).分别在注射后0天、1周、2周、及4周处死小鼠,取全血和主动脉血管组织.用ELISA法测定血清中脂联素浓度;用WB法检测血管组织中标识绿色荧光蛋白(GFP)以确定重组腺病毒的转染率.全自动生化仪检测血常规指标、肝功能(ALT、AST)、肾功能指标(CR、BUN)、心肌酶(CK、CKMB)、以确定重组腺病毒转染的安全性.腺病毒对血常规指标和心肌酶的表达没有显著影响,对肝功能指标谷丙转氨酶(ALT)(1周时组间差异P＜0.01和2周时组间差异P＜0.05)、肾功能指标尿素氮BUN(1周时组间差异P＜0.01)有一过性影响.重组腺病毒可在体内高效介导外源基因脂联素的表达,血清中的脂联素浓度在病毒转染后1周达到了高值,约是正常对照组的4倍(78.28 ±15.02 vs 23.42 ±5.35)μg/ml,2周内稳定表达.1周时GFP蛋白在血管组织中表达的量高,1周时GFP/GAPDH为83.63±1.50％,随后逐渐降低,2周时GFP/GAPDH为54.00±4.00％,4周时GFP/GAPDH为22.00±3.99％.重组腺病毒注射存在一过性的肝毒性和肾毒性,但是对动物的生理状态没有显著影响.重组腺病毒对ApoE-/-小鼠的血管组织有高效转染、2周内安全、稳定表达的特性.
