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猪跟腱止点纤维软骨细胞的分离、体外培养及鉴定
[目的]探讨猪跟腱止点纤维软骨层细胞的分离、培养及鉴定方法,观察纤维软骨细胞的生物学特性.[方法]体视显微镜下切取贵州迷你小香猪跟腱止点纤维软骨层组织并剪碎,经过胰蛋白酶和Ⅱ型胶原酶两步酶消法,后在含10％ FBS的DMEM进行培养和传代,使用HE、阿利新蓝、Ⅰ、Ⅱ型胶原免疫组织化学染色鉴定.[结果]成功分离获得纤维软骨细胞.鉴定证实实验细胞具有纤维软骨细胞共同生物学特性.HE染色:细胞浆蛋白多糖成分被染成深浅不同的粉红色;阿利新蓝染色:纤维软骨细胞内见蓝紫色异染颗粒,细胞核深染,细胞周围有少量异染颗粒出现.Ⅰ、Ⅱ型胶原免疫组织化学染色:纤维软骨细胞胞质被染成棕黄色.[结论]成功分离和培养了猪跟腱止点纤维软骨层细胞,针对纤维软骨细胞特性,通过不同染色方法进行了联合鉴定.本实验建立的腱止点纤维软骨细胞分离、培养方法是一种简便可靠的方法.
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人腱止点软骨细胞的分离培养及形态学特征观察
目的 探讨人膝关节前交叉韧带( anterior cruciate ligament,ACL)腱止点软骨细胞的分离方法,观察软骨细胞的生物学特性.方法 取1例来源于交通事故的健康志愿者膝关节前交叉韧带腱止点标本,胰蛋白酶去除纤维组织后Ⅱ型胶原酶消化,观察细胞形态变化,使用甲苯胺蓝染色鉴定软骨细胞表型.结果 甲苯胺蓝染色见软骨细胞内蓝紫色异染颗粒,细胞核深染；细胞周围有少量异染颗粒出现.Ⅱ型胶原免疫组化染色:软骨细胞细胞质被染成棕黄色,细胞核不着色,具有软骨细胞共同生物学特性.结论 成功分离提取了腱止点软骨细胞,其形态和生物学特性与关节软骨细胞相似,但细胞密度低于相同方法分离的关节软骨细胞.
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保留胫骨止点的腘绳肌腱移植重建膝交叉韧带
目的 研究保留胫骨止点的自体腘绳肌肌腱移植重建交叉韧带的优缺点.方法 自2001年7月至2005年3月间我院收治交叉韧带断裂患者33 例,前交叉韧带断裂17 例,后交叉韧带断裂10 例,前后交叉韧带断裂并外侧副韧带断裂3 例,前后交叉韧带并内侧副韧带断裂3 例.其中男性28 例,女性5 例.平均年龄28.2 岁(18～45 岁).平均随访时间3.9年(范围0.5～5年).使用特制取腱器将半腱肌腱和股薄肌腱从肌腹中抽出,回折锁边缝合成四股,穿过胫骨和股骨隧道.远端经过骨孔以界面钉固定或经过骨桥固定.结果 按照JOA膝关节韧带损伤疗效判定标准,手术前后评分分别为46.0分和79.8分,Lysholm膝关节评分标准手术前后分别为54.4分和80.3分(P＜0.001).胫骨前移:术前平均10.9 mm(范围9～13 mm),术后平均3.6 mm(范围0～7 mm)(P＜0.001).结论 保留胫骨止点的腘绳肌肌腱移植,可以适用于前后交叉韧带重建,其优点是取材方便,并发症少,胫骨隧道不再需要内固定.
