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微小RAN-630文献资料
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抑制miR-630表达对宫颈癌细胞紫杉醇敏感性的影响及机制
目的 观察制微小RAN-630 (miR-630)表达对宫颈癌细胞紫杉醇(PTX)敏感性的影响,并探讨其机制.方法 将宫颈癌PTX耐药细胞株HeLa-PTX分为3组,抑制组和空载组分别转染miR-630小干扰RNA质粒、对照空载质粒30 nmol/L,空白对照组不转染,48 h后收集细胞.采用MTT法检测PTX对HeLa-PTX细胞的半数抑制浓度(IC50),实时荧光定量PCR法检测细胞中的miR-630、凋亡蛋白酶活化因子(APAF-1) mRNA,流式细胞术检测细胞的凋亡情况,Western blotting法检测凋亡相关蛋白聚腺苷二磷酸核糖聚合酶(PARP)、Caspase1、Caspase3.结果 抑制组、空载组、空白对照组PTX IC50分别为(35.61±2.87)、(142.57±3.63)、(144.31±2.42) nmol/L,抑制组tPTX IC50低于NC组和空白对照组(P均=0.000).与空载组及空白对照组比较,抑制组miR-630表达量降低而APAF-1 mRNA表达量增加(P均=0.000).抑制组、空载组、空白对照组细胞凋亡率分别为19.60％±2.56％、10.20％±1.08％、8.00％±1.53％,抑制组细胞凋亡率高于空载组和空白对照组(P均=0.000).与空载组及空白对照组比较,抑制组PARP、Caspase1、Caspase3相对表达量增加(P均=0.000).结论 抑制miR-630表达能增强宫颈癌细胞对PTX的敏感性,这可能是通过调节细胞凋亡及APAF-1基因表达实现的.
